文档介绍：中国医科大学
硕士学位论文
乙醛对大鼠心肌细胞线粒体功能及形态影响的研究
姓名:王国锋
申请学位级别:硕士
专业:临床医学;内科学
指导教师:金元哲
201205
乙醛对大鼠心肌细胞线粒体功能及形态影响的研究的方法结果目·中文结构式摘要·长期大量饮酒可以加重高血压,引起酒精性心肌病和心律失常。酒精性心肌病的机制包括乙醇、乙醛直接干扰心肌细胞的各种功能、二者对心肌直接的毒害作用和氧化应激等。乙醛可直接破坏心肌细胞膜的稳定性,如肌纤维膜脂肪酸合成的异常、、抑制线粒体呼吸链功能及三羧酸循环的某些酶的活性;乙醛可减少心肌细胞蛋白质如介导心肌收缩的肌钙蛋白、钙调蛋白、肌动蛋白等多个蛋白的合成,导致以钙的转运及结合异常为主的心肌细胞钙循环的紊乱等。本实验旨在观察大鼠乙醛慢性暴露后透射电镜下心肌细胞线粒体形态,检测线粒体内膜琥珀酸脱氢酶以及血浆超氧化物歧化酶、丙二醛的含量,进一步探讨酒精心肌损害的特点以及酒精性心肌病的可能机制。将健康大鼠只按体重随机分为四组:正常对照组只、低剂量组只、高剂量组只和左卡尼汀组只。给药苁蓖干涞缇迪鹿鄄煨募∠吡体形态、生化反应方法检测线粒体琥珀酸脱氢酶痭血浆超氧化物岐化酶琒⒀=以及酶联免疫分析法检测血浆肌钙蛋白琓的含量。⑼干涞缇迪驴杉笛樽樾募∠吡L宄鱿炙住⑾吡L寮刮陕摇⑨障б约线粒体膜缺失等改变,与对照组比较差异显著。⒆罂嵬∽榈男募∠赴吡L彗晁嵬亚饷副然钚越细呒亮孔楦.,低剂量组心肌细胞线粒体琥珀酸脱氢酶比活性较对照组降低琒.。
结论关键词⒆罂嵬∽檠=趸锲缁负拷细呒亮孔楦哉兆檠浆超氧化物歧化酶含量较低剂量组为高.。相应地,血浆丙二醛含量左卡尼汀组较高剂量组低.,对照组较低剂量组为低.。⑵胀ㄏ晕⒕迪鹿鄄煨募∽橹±砬衅图亮孔椤⒆罂嵬∽榧岸哉兆槲醇有明显差别,心肌细胞形态大致正常。高剂量组心肌细胞可见出现空泡变性。⒁胰└骨蛔⑸渌鹕肆舜笫笮募∠赴募∠吡L宓乃鹕擞任C飨裕吡L是乙醛损害心肌细胞的作用靶点之一。这种损害作用在心肌细胞形态出现异常改变之前就已经发生,即乙醛对心肌细胞线粒体的损伤是其心肌损害的早期改变。⒁胰└骨蛔⑸浜笙吡L宓谋曛久哥晁嵬亚饷腹δ芗醯停罂嵬】梢约轻乙醛的此种心肌损害。⒀趸げ斡肓艘胰┑男募∷鸷蹋罂嵬《杂谝胰┑男募∷鸷ψ饔发挥了一定的保护作用,包括保护心肌线粒体,改善线粒体能量代谢,发挥抗氧化清除自由基的作用等。乙醛;酒精性心肌病;线粒体;超氧化物歧化酶;丙二醛
·英文结构式摘要·琣谢,痥..,瓵瓻.:痥瓻,琹
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肌钙蛋白超氧化物歧化酶丙二醛酒精性心肌病三羧酸循环乙醇脱氢酶乙醛脱氢酶三磷酸腺苷.
乙醛对大鼠心肌细胞线粒体功能及形态影响的研究前言材料与方法一、动物分组及给药·论文·膜的稳定性,如肌纤维膜脂肪酸合成的异常、⒌图亮孔、高剂量组口组妥罂嵬∽棰僮。对照组长期大量饮酒可以加重高血压,引起酒精性心肌病和心律失常【俊>凭孕募〔〉幕瓢ㄒ掖肌⒁胰┲苯痈扇判募∠赴母种功能、二者对心肌直接的毒害作用和氧化应激等【。乙醛芍苯悠苹敌募∠赴交换体在内的多个膜泵功能的异常、抑制线粒体呼吸链功能及三羧酸循环琓哪承┟傅幕钚裕灰胰┛杉跎傩募∠赴鞍字嗜缃导心肌收缩的肌钙蛋白、钙调蛋白、肌动蛋白等多个蛋白的合成,导致以钙的转运及结合异常为主的心肌细胞钙循环的紊乱等等。正常情况下琥珀酸脱氢酶琒胂吡L迥谀そ岷希侨人嵫反还痰墓键酶之一,其是线粒体的一种标志酶,是衡量心肌细胞损害程度的一个重要指标】。超氧化物歧化酶作为机体重要的抗氧化酶,能有效清除茸杂苫槐作为脂质过氧化的代谢产物,是反映机体脂质过氧化水平的重要指标。二者可反映机体抗氧化与氧化的大致水平。本实验旨在观察大鼠乙醛慢性暴露后透射电镜下心肌细胞线粒体形态,检测线粒体内膜琥珀酸脱氢酶以及血浆超氧化物歧化酶、丙二醛的含量,进一步探讨酒精心肌损害的特点以及酒精性心肌病的可能机制。.,中国医科大学实验动物中心提供浦睾蟀刺逯乇嗪牛凑账婊帕斜硭婊殖组:正只,其余各组各只。各组大鼠按昼夜时程各小时,在室温.℃及稳定湿度条件下,用平衡饲料预喂养芎罂J际笛椤8┓椒ǎ组痥
二、主要实验设备和仪器三、主要药品与试剂四,液体配制五、差速离心法提取心肌线粒体及电镜观察醛胱罂嵬∽⑸湟合嗤莼纳硌嗡辽日~次腹腔注射;痥胰与左卡尼汀注射液相同容积的生理盐水毫升找淮胃骨蛔⑸洌/乙醛/左卡尼汀日一次腹腔注射;榉执胃骨蛔⑸与乙醛注射液及左卡尼汀注射液相同容积的生理盐水。通过预实验观察及参考曾庆华、王旭等人的实验数据确定乙醛的应用剂量为痥/。预实验观察应用乙醛/腹腔注射后秒大鼠翻正反射消失,持续种雍笞行恢复,高于此剂量大鼠易致死亡。实验时间埽刻