文档介绍：广西大学
硕士学位论文
水稻成熟胚高频再生体系的建立及其生理生化特性的研究
姓名:张宗琼
申请学位级别:硕士
专业:作物遗传育种
指导教师:何龙飞;李志刚
20040501
水稻成熟胚高频再生体系的建立及其生理生化特性的研究摘要诤,籇的诱导培养基中添加适当浓度的晃阅芟灾岣咚云溆盏蓟淼难芯糠⑾郑一队和共同作用诱导产生的研究细胞分裂素对愈伤组织诱导和分化的影响,以期建立一个高频再愈伤组织过氧化物酶、酯酶、超氧化物歧化酶同工酶均有新酶带出现。这煌蛐退居俗橹只讨校趸锩浮⑺嵝粤姿狨酶的活性变化与分化有关;过氧化物酶和酯酶同工酶谱均有相对泳动率相高频再生体系是水稻遗传转化的基础,本实验以水稻成熟胚为外植体,生体系,同时对愈伤组织诱导和分化过程中的生理生化特性进行研究,为探讨愈伤组织分化机理提供理论依据。研究结果如下:稻成熟胚的出愈率和愈伤组织质量。鲇蚀锏%。此类愈伤组织分化再生,最高分化率达ィ罡叱擅缏蚀%,易生根,易成活,些酶带与愈伤组织分化有关。同的酶带出现或消失,这两种酶可以作为细胞分化的标志酶。极易分化,在含不同组成和不同比例植物生长调节剂的分化培养基中均可再生苗能正常结实。只讨杏俗橹扇苄缘鞍字省⑾赴诘鞍字屎涂扇苄宰芴的含量均有相应的变化,分化第焓北浠畲蟆关键词:水稻成熟胚高频再生体系过氧化物酶酯酶同工酶
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第一章前言水最城薜船鞠眈舰再生磷裹韩ǎ⒏财渖蘩妓匦缘难校广西忱掌司浚栖婆二十世纪以来,生物技术的发展日新月异。在蚐创立的细胞学说基础上,年德国植物学家哈伯兰特提出植物的单个细胞可能具有分化成完整植株的全能性【浚佣J剂酥参镒橹胩迮嘌男缕U隆V参镏屑ざ姆⑾郑凹に仄胶狻奔偎档奶岢鲈玻约跋赴苄缘闹っ鞔蟠蟠俳酥参一种组织或单个细胞以及原生质体从植物体分离并置于适宜的营养和环境条件下,使之继续生长、分化并发育成完整的再生植株的培养技术。它涉及到个体、器官、组织、细胞、分子各个水平的有关问题。这一培养系统不仅减少了组织细胞间相互制约的影响,而且还可在人工控制的条件下按预期的目标设置方案,来研究细胞分化和发育的规律、器官分化和形态建成在植物体中控制的机制、内外条件的影响和发育过程中的分子基础、细胞转化与变异体筛选等等【。植物组织培养自其产生以来得到了迅速的发展,在生命科学的各个领域有着广泛的应用。植物细胞和组织培养技术是生物技术的重要组成部分,它为基因工程、遗传转化提供基础,又给遗传学、细胞学、植物生理生化、病和细胞杂交、次生代谢产物的生产和种质资源的保存与交换都是植物组织培养在科学研究和生产实践中应用的领域。随着现代分子生物学和植物基因工程的兴起,利用生物技术对农作物进行遗传改良已成为高效的遗传改良手段及各国育种家关注的重点。水稻上重要的粮食作物之一,种植面积广,需求量大,进行水稻品种改良,提高其抗性、产量和品质有着重要的意义。如何有效地利用现代生物技术对水稻品种进行遗传改良,各国育种家都进行了大量的研究。基因转化、突变体选育、体细胞融合等现代生物技术的应用都离不开植物的组织培养,然而单子叶植物尤其是禾本科植物的组织培养一直是个难点,无论是愈伤组织的诱导还是再分化体系的建立,单子叶植物都比双子叶植物困难组织培养的发展。植物组织培养侵冈谌斯の蘧跫刂葡拢阎参锾宓囊桓銎鞴伲理学等研究提供了条件和方法,脱毒及离体快繁、花药培养和细胞育种、原生质体培养三鞘澜
水稻窟崽雇毛蔫奠隔芷笨裹钌诧立覆其生司特性蒯觉λ广西冀掌司北亡学出。崔得多【薄R桓龈咝实挠俗橹纬珊驮偕淖橹嘌逑凳腔蜃;⑾赴诤稀⑻细胞变异和筛选等生物技术在育种上应用的基础【。贾士荣统。随着遗传学和分子生物学的发展,基因转化技术已日趋成熟,但是由于受基因型的于寻找一个具有广泛适应性的水稻高效再生体系。自从年,古桥首次在《科学》上报道了在无菌条件下能从水稻的茎节诱导出愈伤组织,水稻的组织培养得到很快的发展。年,前田英三从水稻种子诱导出愈伤组织,,同时还证明愈伤组织的产生除了基本培养基外,⒁肚省⒒ǚ哿!⑴吣摇⒃质体、幼胚、幼穗、根、花药等诱导出愈伤组织和再生出植株【】。尽管如此,水稻的组织培养还是远远不能满足生产和科学研究的需要,仍存在受外植体和基因型限制、出愈难有效的对此过程进行调控。为此研究者对如何提高水稻培养力及其机理都进行了大量为了得到良好的培养体系,人们对相关的园素都进行了大量研究,试图掌握其规律,探寻其机理以便进行人为调控、应用于生产。影响植物组织培养的因素很多,有外植体类型、基因型、培