文档介绍：山西医科大学
硕士学位论文
刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆、表达、纯化及免疫保护
性研究
姓名:刘转转
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:殷国荣
20090315
纯化株弓形虫速殖子,提取总簧杓坪铣梢锊⒁膈蔙刚地弓形虫虻目寺⒈泶铩⒋炕懊庖弑;ば匝芯中文摘要量约仍て谥荡笤实验目的实验方法只滴鼻免疫小鼠危骷涓周,溶于此校哉兆橛玫攘縋滴鼻。末次免实验结果第一部分:构建重组质粒/⒃诖蟪Ω司懈咝П泶锟扇苄缘鞍住J占馄鯫第二部分:对原核系统表达的进行纯化、免疫原性分析并制备抗血清。大量表达蛋白加入不同浓度的蛋白酶抑制剂—一苯甲基磺酰氟鄄旄玫鞍椎慕到馇榭觯徊捎妹庖咦榛椒ǎ訮做初步定位。第三部分:观察不同剂量滴鼻免疫小鼠诱导的黏膜和系统免疫应答及抗弓形虫感染作用。/凰婊治组,免疫组分别用甥、“摇鹯淑唷荆分离并计数肠上皮内淋巴细胞从弓形虫株中扩增出的蚱危⒊晒菇ㄖ刈橹柿/,目的基因在大肠杆菌/懈咝П泶铮喽苑肿生高滴度的特异性抗体,该蛋白在.℃保存苁笨J冀到猓锤炊橙诳杉铀倨浣到猓幻庖组化结果显示大鼠抗G迥芴匾煨允侗鹚僦匙又械腜,植疾课怀首厣ǚ从Α对刚地弓形虫基因进行克隆、表达、纯化,分析其免疫原性,观察庖咝∈笥盏嫉酿つぜ跋低趁庖哂Υ鸺捌淇构纬娓腥镜哪芰Γ教諸Ⅸ作为弓形虫疫苗候选抗原的可能性。盖形坏悖琑扩增编码幕蚱慰寺〉皆酥柿盖小及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌/杏肐盏急泶铮泶锊锞璖进行鉴定。可溶性蛋白,以层析法纯化蛋白,用兔抗弓形虫血清做銎涿疫原性;以纯化的は伦⑸涿庖遅笫螅珽舛ㄑG逯锌固宓味龋淮炕闹刈疫后第胠×鏊僦匙樱还辔腹セ魅ú啃∈螅鄄煨∈蠼】底纯觥9セ骱蟮静脉丛采血,颈椎脱臼处死小鼠,检测肠液脱G錓,计数肝、脑组织内弓形虫速殖子,琁捌⒘馨拖赴显示纯化后的能被兔抗弓形虫免疫血清识别;免疫大鼠后可诱导产,山西医科大学硬士学位论文
∈蟪鱿质ā⒕氲⒒疃跎佟⒁安墒臣跎俚纫斐1硐郑荷僦匙邮显著低于甥、烬、结论关键词:刚地弓形虫;豢寺。辉吮泶铮坏鞍状炕幻庖咴裕坏伪敲庖撸组和对照组小鼠死亡唬搿组死亡弧伦楦巍⒛、。成功构建重组质粒/⒃诖蟪Ω司懈咝П泶锟扇苄缘鞍住T讼低潮泶锏具有免疫原性。閞伪敲庖吒行в盏剂损つず拖低趁庖哂Υ穑⒂行У攻击后第组死亡唬抗弓形虫感染。免疫保护山西医科大学硕士学位论文
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缩略词山西医科大学硕士学位论文
指导教师签名:—臣晔论文作者签名:必筮受学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书本人刘转转声明,所呈交的学位论文系在导师殷国荣指导下本文独立完成的研究成果。于他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果:⒔换匮J谟璧难恢な椋⒀?稍谙喙孛教迳隙宰髡弑救说男形=型ūǎ⒈疚陌凑昭9娑ǖ姆绞剑砸虿坏比〉醚桓T斐傻拿鸷Γ泄ǹ5狼浮⒈救烁涸鹨蚵畚某晒皇挡姆删婪住本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位仍然为山西医科大学。文中任何引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属论文作者签名:C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑旧鞯陌嫒ü樯轿饕娇拼笱校淳砜桑魏蔚ノ患叭魏胃鋈瞬坏蒙米允褂
刚地弓形虫难芯拷盏毓纬鍼蛋白家族虫在有氧环境中生存起重要作用。本文综述了诟盏毓纬嬷械姆掷嗉白饔没啤自然界中,生物代谢普遍产生活性氧超氧阴离子和羟基自由基等。高浓度的这些物质可以氧化蛋白质、脂类以及引起核酸变性等,对机体造成严重的危害。生物在进化过程中,形成了各自的抗氧化系统,以抵抗活性氧的破坏作用。因此,生物体内通常含有多种内源性酶类,如过氧化氢酶超氧化物歧化酶⒐入赘孰墓趸锩、谷胱甘肽还原酶皃家族成员的存在。邢灾目寡趸δ埽送饣共斡谙赴鲋秤敕只⑾赴藕抛5技氨护其它蛋白的氧化等。本文综述了刚地弓形虫鞍准易宓姆掷嗉白饔没啤烷基过氧化氢还原酶取辏珻取】首次在酿酒酵母中发现痻,分子量为畛醣幻[匣匾煨钥寡趸。人们对难芯浚饕@丛从诮湍负鞍准易宸掷且恢钟刖哂谢乖钚缘陌腚装彼崦芮邢喙氐牡鞍祝谠松锖驼婧松物中均高度