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复合核酸疫苗免疫保护性的研究弓形虫一籖籋中国人兽共患病学报李婷票,仲维霞藓5,王英婷ü愣,魏庆宽能识别重组蛋白抗原;免疫接种后搴虲均增殖明显,组问有显著性差异.;琍。。·獂,猟弓形虫且恢窒赴诘专性寄生原虫。可引起人兽共患性弓形虫病,弓形虫的致病性与免疫缺陷、免疫功能低下及垂直传播密切相关,其感染率高、危害严重;弓形虫病至今尚无有效的防治药物,亟待发展有效的防治措施和方瑾间等。结果一籖春虾怂嵋呙缒苡辗⑿∈蟛赴庖吆吞逡好庖叻从ΑP∈笱G蹇固宓味雀卟琗—,文章编号:———摘要:目的研究一复合核酸疫苗的免疫保护作用。方法籅。痗小鼠随机分为组,其中笛樽椋渴蠓直鸺∪庾⑸鋚籶一一琾籶一、一各;哉兆槊鼠分别注射空质粒“9裁庖次,每次间隔┐瘟考颖丁D┐蚊庖吆髯榉直鹑只小鼠的血清和脾组织,检测:、案飨赴蜃印8髯槠溆嘈∈蟾骨蛔⑸銻旯纬嫠僦匙个/每鼠,观察其存活时,实验组疌比值增加明显。ⅰ⒘馨徒嵯赴嘌杭把G逯凶韵胞介素。一、。一,丫干扰素一、肿瘤坏死因子胁煌潭鹊纳撸绕涫茄G逯猩咦钗O灾9虫攻击感染后,实验组与对照组比较,实验组小鼠存活时问明显延长。结论该复合核酸疫苗具有较强的免疫原性,能产生良好的免疫保护作用。关键词:刚地弓形虫;核酸疫苗;免疫保护中图分类号:.南妆晔堵耄篈,—琙猟—,,/,,寸珻.,.,疌.,.篢蕉∽匀豢蒲Щ蜕蕉∫窖Э蒲г嚎蒲蕉∫窖Э蒲г海蕉≈耙滴郎胫耙挡》乐窝、,。:籖籋,。一籖籋。一籖一。瓵瓸.—。。:‘魏庚宽,簑..作者单位:蕉∫窖Э蒲г海蕉〖纳娌》乐窝芯克媚究院,济南;蕉〖媚械谝蝗嗣褚皆骸<媚—.,
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鼠—、结合物为二抗,对硝谟昧魇较赴羌觳釩、徊糠种李瑾等:弓形虫~籖一春虾怂嵋呙缑庖弑;ば缘难芯法。疫苗防治是发展方向,国内外已开展了抗弓形虫不同类型的疫苗研究,但迄今尚无有效疫苗问世。核酸疫苗是近几年免疫学和分子生物学研究的新兴领域,它是将编码抗原的基因插入载体质粒中构成重组体,直接免疫接种机体,在接种部位摄取表达。,达到抗感染目的的一种疫苗。该类疫苗弥补了传统的灭活及减毒疫苗的低效或回复突变的潜在危险,以及基冈工程多肽疫苗的制备费用高和制备过程复杂等缺点。本研究将制备的一一核酸疫苗直接肌注免疫小鼠,观察其在宿主体细胞内表达和产生内源性免疫原的结果,以及在体内诱导的免疫应答反应,以评价其免疫保护作用。牧嫌敕椒材料虫株、质粒及疫苗株弓形虫为本实验室保种,—真核表达质粒南第一军医大学寄生虫教研室惠赠,弓形虫一一酸疫苗、重组蛋白、弓形虫全虫抗原均为本实验室构建和制备。鼠抗鼠狝狹的、。的同型对照:异硫氰基荧光素标记鼠琄、。的同型对照:藻红蛋白标记鼠琄,等均为美国公司产品,羊抗鼠——狝碱性磷酸酶岷衔铩⒌孜锒韵趸交姿钠为静罚蚩故罄备趸物酶昙堑腎结合物、宦容练庸鹤员本┲猩缴锛际跤限公司诜肿,其它常规试剂均为国产分析纯。.笛槎~芰~清洁级纯种珺/∈只菩鄹靼,购于山东大学医学院动物中心。仪器超声粉碎仪汀5鹿、:培养箱型,英国⒆贤饪见分光光度计录悠、酶标仪型,芬兰⒛ü、流式细胞仪方法免疫接种籅,/∈蠼又智笾ḿ∪庾⑸./。布比卡因肛缓随机分为每组只渲组为实验组。分别注射重组质粒一籖籋、,哉兆空质粒和空白对照渴笞⑸鋚—的肚看渭涓沧⑸次,末次注射量加倍。.固寮觳分别于