文档介绍：福建农林大学
硕士学位论文
龙眼(Dimocarpus Longan Lour.)种子败育的蛋白质组学研究
姓名:刘浩
申请学位级别:硕士
专业:植物学
指导教师:陈伟
20090401
摘要蛋白质组学研究在功能基因组时代发挥着越来越重要的作用。双向电泳是其中的关键技术之一。龙眼是无患子科植物中最名贵的水果之一。焦核龙眼是龙眼中的珍稀品种,但其无核率的不稳定性严重影响了该品种的推广种植和经济效益。至今对龙眼焦核机理的研究尚停留在形态解剖和生理生化的研究上,而对龙眼焦核分子机理的研究还有待深入。本研究改进和优化了龙眼种子蛋白质的提取方法及电泳条件,得到了高分辨率和高重复性的双向电泳图谱,在龙眼种子双向电泳图谱上检测到个多个采用比较蛋白质组学技术分析了三个不同时期龙眼正常种子和败育种子的蛋白质组之间的差异,共发现了个差异蛋白点,其中个蛋白点上调表达,个蛋白点下调表达,龅鞍椎愀丛颖浠Mü,共鉴定出了其中的个蛋白点,鉴定成功率为%。对蛋白分析,进一步证实了蚦诹壑肿影苡中的差异表达。生物信息学分析表明它们隶属于龉δ芾嗳骸0芰坑胛镏代谢相关的蛋白;植物细胞程序性死亡相关的蛋白%豢寡趸饔氮代谢的蛋白%合赴只喙氐牡鞍以及其他蛋白%呼吸代谢途径受到高度的干扰;抗坏血酸过氧化物酶等蛋白的下调表达,降低了龙眼种子细胞的抗氧化功能,导致细胞内活性氧增加,这可能是龙眼种子败育的诱导因子之一;同时分子伴侣相关蛋白的下调表达使得败育的龙眼种子具有较低的蛋白质折叠和保护功能。而半胱氨酸蛋白酶的明显上调表达导致龙眼细胞程序性死亡可能是龙眼种子败育的关键事件。总之,本研究通过差异蛋白质组学研究不同时期龙眼正常种子和败育种子的蛋白质差异表达,首次报道了龙眼种子败育相关的一些重要功能蛋白质的表达特征的同时,也为进一步揭示龙眼种子败育的分子机制提供了重要的蛋白质水平信关键词:蛋白质组学;双向电泳;质谱;龙眼;种子败育;差异蛋白蛋白点。;分子伴侣;次生代谢相关的蛋白%徊斡其中能量与代谢相关蛋白是下调表达的主要类群,说明败育的龙眼种子中的息。福建农林大学硕士毕业论文
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缩写词福建农林大学硕士毕业论文
、澎学位弦论文作者亲笔签名:∥日期:·啵日期:彻唷ぃ学位弦论文作者亲笔签名:包日期:加踰指导教师亲笔签名:卵学位弦论文作者亲笔签名:秒独创性声明论文使用授权的说明本人声明,所呈交的学位弦论文,是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯他人知识产权的行为,由本人承担应有的责任。本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位弦论文的规定,即学校有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或年后解密可适用本授权书。不保密,本论文属于不保密。口/部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密,在口
研究。因此而产生了一门新兴学科一蛋白质组学。南鬃凼蛋白质组学概述随着人类基因组计划的顺利完成,生命科学的研究已经从基因组时代进入到后基因组时代,研究的重点侧重于基因功能的研究。目前功能基因组学研究中用得比较多的策略是从水平来考虑的,如扩增片段长度多态性、基因表达的系列分析、微阵列等。这些策略的前提条件是通过细胞中的水平反映蛋白质的表达水平。然而,基因表达水平与蛋白质水平有时并不完全一致,从到蛋白质,存在三个水平的调控,即转录后水平调控、翻译后水平调控。实验也证明,岫扔氲鞍字史岫炔⒉怀收喙兀绕涠杂谝恍低丰度蛋白来说,相关性更差8匾5氖牵鞍字矢丛拥姆牒笮奘巍蛋白质与蛋白质的相互作用、蛋白质的亚细胞定位等几乎无法从水平来判断。因此完全有必要从蛋白质水平上去研究基因的功能。而生命活动的发生往往是多因子的,涉及到多个蛋白质的作用,它们组成一个相互作用的蛋白网络。因此,更全面和深入的认识生命的复杂活动,,蛋白质组学可以分为基于胶的蛋白质组学、基于质谱目前应用最多的是基于胶的蛋白质组学,其主要流程包括蛋白质提取、蛋白质双向电泳技术分离、蛋白质染色、凝胶图谱分析、蛋白点切割、蛋白酶解和质谱鉴定,生物信息学分析。其中双向电泳技术和质谱技术是蛋白质组学研究的两大关键技术。.蛋白质的提取蛋白质的提取是双向电泳中关键的一步。目前