文档介绍:天津大学
硕士学位论文
Bacillus subtilis 24/pMX45核黄素发酵种子培养及氮源影响
的研究
姓名:李建国
申请学位级别:硕士
专业:生物化工
指导教师:赵学明
20030101
摘要用。其他氮基酸对核黄索发酵影响不大。关键词:核黄素重组枯草芽孢杆菌氨基酸维生素无机离子本文着重从种子培养,碳源,氮源以及培养基中各种小分子组分对核黄素发酵的影响等几方面对重组枯草芽孢杆菌/嘶扑胤⒔徒辛搜芯俊采用摇管活化代替斜面活化,可以缩短培养时间,得到的种子液质量稳适合的种子培养基为フ崽牵%酵母描提物,皇室说呐嘌温度为℃,摇床转速为,接种量为ィ鲜实呐嘌奔涫;作为种子检测指标,种子液。在之间,核黄素单位在以上。碳源,。而葡萄糖,果糖可产生分解代谢产物抑制,对核黄索发酵不利。本文对培养基中不同氮源对核黄素发酵的影响进行了研究。比较了酵母粉为氮源和酵母抽提物为氮源时核黄素发酵情况。,矿物质,氮基酸对核黄素发酵的影响。研究表明,维生素类物质对核黄素发酵的影响不大。无机离子,保珻保現保琙院嘶扑夭索发酵有较大的不利影响。而丝氨酸,苏氨酸,缬氨酸对核黄素发酵有促进作定,有利于种子培养的规范化。蔗糖,葡萄糖,果糖可作为/暮嘶扑胤⒔偷无影响。混合氨基酸类对核黄素发酵有负作用。实验表明,甘氮酸。谷氨酸,天冬氨酸,异亮氨酸,
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学位论文作者签名:李建加。;年掠学位论文作者签名:歹§遮签字日期:钐矿刀年伊月跞独创性声明学位论文版权使用授权书或撰写过的研究成果,也不包含为获得苤壅盘鲎或其他教育机构的学位或证本学位论文作者完全了解苤盗盘茔有关保留、使用学位论文的规定。特授权叁鲞盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检签字日期:肋。逻苋本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢之处外,论文中不包含其他人已经发表书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄋ得签字日期:导师签名一
核黄素是生物体内不可或缺的维生素,人和高等动物必须依赖于外部供给。法是化学半合成法和微生物发酵法。微生物发酵法生产核黄素,以粮食为主要原料,产品质量好是其主要优点。用微生物发酵法取代污染较严重的化学半合成法,还需进一步改进技术,提高微生物发酵法生产核黄素的生产效率,降低生产成本。微生物发酵法使用的生产菌主要是阿舒氏假囊酵母霉荩甮等真菌。年代以来,以枯草芽孢杆菌、产氨棒状杆菌等原核微生物为受体菌,采用基因工程技术构建出了多株高产核黄素的工程菌,使核黄素的发酵单位达到了以上,甚至接近,这是核黄素工业生产技术的一次飞跃。使用基因工程菌作为核黄索的工业生产菌株,在发酵工艺优化及控制方面,还存在许多问题。传统的核黄索发酵使用真菌,在细胞的生长、代谢调控机制方面,与原核微生物为受体菌的基因工程菌相差甚大,发酵工艺,如培养基组分、培养条件等可借鉴性不大。因此,基因工程菌工业化生产核黄素,在发酵工艺,过程控制以及分离方法等方面都需要重新研究,以便在大规模的工业生产中,能够充分发挥基因工程菌的优势。在发酵过程中,培养基的组成对于发酵产物的过量合成是最重要的影响因素。特别是对于基因工程菌,由于外源基因的引入,菌体代谢负荷的增大,本身代谢调控机制的改变,使得基因工程菌对营养物质和培养条件的要求更加苛刻,对环境的变化更加敏感。这些使得基因工程菌的发酵控本文以能够过量合成核黄素的基因工程菌研究对象,首先对种子培养条件以及不同碳源对核黄素发酵影响进行了研究,然后在此基础上重点研究了不同氮源对核黄素发酵的影响,并根据其组成上的差异,深入研究了维生素,无机离子,氨基酸对核黄素发酵的影响。创目前核黄素广泛用于医药、食品和饲料添加剂等方面。核黄素的主要工业生产方和棉病囊制更为复杂和困难。为看/前言
第一章文献综述核黄素的理化性质、功能和用途核黄素的生产方法核黄素是一种水溶性的逦兀次,其分子量为,其分子式为#琀:。低趁,欢谆籇一核糖醇基核黄素是黄色或橙黄色的细针状结晶,微臭,微苦,加热到媸狈纸狻核黄素微溶于水芙舛仍/,饱和水溶液值约为芤撼驶色并有绿色荧光。略溶于乙醇。不溶于乙醚和氯仿。易溶于碱性溶液,但不稳定易分解。对光和紫外线辐射敏感,但对热和空气中的氧稳定⋯。核黄素在生物体内以黄索单核苷酸洲突扑叵汆堰识塑账的形式存在,它作