文档介绍：遵义医学院
硕士学位论文
大鼠卡氏肺孢子虫DHFR和DHPS基因序列的测定与同源性分析
姓名:杨霞霞
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:万启惠
20090501
大鼠卡氏肺孢子虫和基因序列的测定与同源性分析晏研究生:杨霞霞导师:万启惠教授捅目的分析我国重庆大鼠卡氏肺孢子虫的二氢叶酸还原酶和二氢叶酸合成酶基因的序列特性,应用拗菩云纬ざ榷嗵甊技术分析基因的变异。方法玫厝姿闪姿崮谱⑸湟焊构晒灯は伦⑸的方法,用大鼠建立肺孢子虫肺炎动物模型。笛榉肿椋赫6哉兆正常大鼠跣远哉兆给磺胺药的正常大鼠粜远哉兆建立模型未给磺胺药的大鼠褪笛樽建立模型并用磺胺药治疗的大鼠肺组织印片六亚甲基四胺银染色观察卡氏肺孢子虫琍包囊,ü鄄炱洳±肀浠收集大鼠的肺组织,提取肞方法扩增卡氏肺孢子虫的和基因,纯化扩增产物后测序。检索基因文库,曲型葱苑治觥用虷两种酶对基因的┰霾锝忻盖校⒂。结果笛樽楹脱粜远哉兆榇笫笕ú扛腥綪6哉兆楹鸵跣远哉兆槲捶⑾諴实验组和阳性对照组的和基因┰鼍恃粜裕跣远哉兆楹驼常对照组无扩增。实验组和阳性对照组有黾罨雊】畇畆蛄斜冉希葱跃ィ雊】.序列比较,同源性均为ァJ笛樽榇笫驪基因有黾罨雊】.序列比较同源性分别为%和%。阳性对照组基因序列有黾罨雊】、序列比较同源性分别为%和%。ü。结论厝姿闪姿崮破は伦⑸浞ㄊ且恢纸笫蠓捂咦映娣窝锥锬P的良好方法。笛樽楹脱粜远哉兆镻和基因的┰鼍恃粜裕遵义医学院硕十学位论文人鼠每氏肺孢子虫平基冈序列的测定与同源性分析.
两个基因与内相应的基因序列同源性较高。具有灵敏性好、分辨率高、重复性好、操作简便、快速等优点,适用于肿孢子虫肺炎的分子生物学诊断。。关键词:卡氏肿孢子虫;;:基因;同源性;甊遵义医学院硕·学位论文人鼠戏捂咦映鍰虳孕蛄械牟舛ㄓ胪葱苑治
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主要英汉缩略词对照表英文缩写英文全称中文全称鷒获性免疫缺陷综合征滩支气管肺泡灌洗液二氢叶酸还原酶二氢叶酸合成酶乙二胺四乙酸六亚甲基四胺银染色人类免疫缺陷病毒卡氏肺孢子虫肺孢子虫肺炎聚合酶链反应限制性片段长度多态性逆转录三羟甲基氨基甲烷盐酸盐单链构象多态性遵义医学院硕十学何论文人鼠戏捂咦映鍰虳列蛄械牟舛ㄓ胪葱苑治Ⅱ籋
导师签名:引芬学位论文作者签名:拗靛签字日期:哆年,月。矽日签字日期:,月日遵义医学院硕士研究生学位论文独创性声明遵义医学院学位论文版权使用授权书本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:本人完全了解遵义医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:遵义医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权遵义医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存学位论文,即:遵义医学院具有学位论文的数字化制品复制权,信息网络传播权和汇编权。保密的学位论文在解密后适用本授权书。签字日期:’
基因组体积小,有助于序列分析濉D壳盎虻牟庑蚴且訡訢克隆片段吾传统意义上的“卡氏肺孢子虫”琍能感染包括人和实验动物在内的多种哺乳动物,免疫力低下的宿主感染后引起致命的卡氏肺孢子虫肺炎琍8贸媸且恢只嵝灾虏〔≡澹钤绶⑾钟陔鼠肺,被误认为是枯氏锥虫生活史中的一种形态【。年状谓涿?氏肺孢子虫。随后研究认为,寄生于人和哺乳动物的肺孢子虫虫种不同,具有宿主特异性。年,ḿ纳谌颂宓姆捂咦映娑R戏捂咦映,而卡氏肺孢子虫则专指在大鼠中发现的肺孢子虫【纠。年,在美国俄亥俄州西西那提召开的国际机会性原生动物讨论会上,与会学者一致同意这一新的命名。同时建议将由耶氏肺孢子虫引起的肺孢子虫肺炎的缩略语仍保留为原来的“被“保豍其含义是“肺孢子虫肺炎”而不是“卡氏肺孢子虫肺炎”乃跣矗剖褂檬裘÷粤酥置鹒俊4送猓谏镅Х掷嗌戏捂咦映一直被认为是原虫,然而,自世纪年代起,越来越多的分子生物学证据表明它是一种真菌。随着获得性免疫缺陷综合征艾滋病牧餍校澜鏟发病率逐年上升,因此难芯恳鸸谕庋д叩娜找重视。由于俅脖硐值姆堑湫托约叭狈煽俊⑽榷ǖ奶逋馀嘌裎V梗模型仍然是研究本虫及本