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人巨细胞病毒及其IE86蛋白对ARPE-19细胞周期影响的研究.pdf

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文档介绍

文档介绍:摘要目的:,研究这种影响与基因的相关性,探讨感染导致巨细胞病毒性视网膜炎的发病机制。方法:用感染同步化于/,同时设未感染组为对照组。于感染后、、、和收获细胞,.椒ḿ觳釮水平的表达,用免疫荧光法检测细胞核内蛋白的表达,法检测早期蛋白、和晚期蛋白的表达。法检测病毒感染天后对细胞增殖的影响,流式细胞术检测感染组与未感染组细胞康谋化。法检测病毒感染后细胞泶锏谋浠2捎肞方法从质粒┰龀鯥蚱危菇ㄕ婧吮泶镏柿..,,.⒚庖哂ü夥ǚ治鯥虻谋泶铩A式细胞术检测质粒转染组及未转染组细胞康谋浠结果:的在病毒感染后第旒觳獾娇J急泶铮琁膍诟染后第旒觳獾娇J急泶铮籋、.、..和..攵哉兆楸冉希差异均有统计学意义。流式细胞术示感染组在感染后第臁天、.%.穑.%.%.%攵照组比较,,自感染炱鸨泶锪靠J枷陆怠谖锤腥鞠赴安《靖腥天时呈低表达状态,自感染第炱鸨泶锪靠J忌仙瞬时转染质粒甆甀笨杉觳獾絀趍胶偷鞍姿降谋达。质粒瞬时转染时后细胞周期中谙赴嚷饰..%攵哉兆楸较,:。可促同步化于/期的一细胞进入冢彝V陀赟期。蛋白可以引起同步化于/。、、
关键词:人巨细胞病毒;.;;细胞周期硕士研究生:刘海燕≡镅ёㄒ师:王斌教授青岛大学硕十学位论文导课题来源:国家自然科学基金支持:青岛市科技局资助项目—山东省“病原生物学”泰山学者工程资助项目
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目录引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一章材料⋯⋯·第二章方法⋯⋯⋯⋯⋯第三章结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·第四章讨论⋯⋯·第五章结论参考文献综述综述的参考文献攻读学位期间的研究成果⋯⋯⋯⋯⋯致谢学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明··
引言巨细胞病毒,是一类在自然界普遍存在但又有严格种属特异性的病毒,属疱疹病毒亚科,包括人、鼠、马、牛、猪、猫等巨细胞病毒,其中致人类感染的病毒为人巨细胞病毒【。人群中感染非常普遍,发达国家人群感染率为%ィ⒄怪泄壹负醮锏%,多数呈隐性感染、亚临床感染或潜伏感染,多数人在儿童或少年期受感染后获得免疫。随着免疫低下状态人群滩⒎派渌鹕恕⑵鞴僖浦埠投裥灾琢龅然颊的增多,感染及其引发的严重疾病有日益增加的趋势。在艾滋病病人,巨细胞病毒性视网膜炎是最常见的机会性感染之一,多见于馨拖赴剖/幕颊【浚允泳跤跋旌艽螅⒔峁购兔庖呦赴Х治鱿允綡术腥究汕址竃视网膜的每一层,包括色素上皮层,可引起进行性全层视网膜坏死、视神经萎缩,最终导致视力丧失“在病毒的感染周期里,病毒复制有两个高峰,即感染细胞后~母粗菩韫惴旱牡馗谋湎赴唬斐上赴矶嗌砀谋浼盎虻幕罨处于不同细胞周期的细胞感染,皆可导致细胞周期的改变。细胞周期阻滞的类型取决于病毒感染细胞时所处的细胞周期时相。在期及期感染可导致细胞周期进展到/拗频悖赟期细胞感染可导致细胞周期受阻,细胞将不能进行有丝分裂。可以通过多个方面影响细胞周期,包括使淖B蓟性增加,对钚约安课坏挠跋欤约岸韵赴酥蠧挠跋臁U庑┳饔霉餐处于及的细胞感染后达到或接近/拗频悖筍期细胞感染导致细胞周期阻滞【俊迄今,在对高等真核生物的研究中,已鉴定出有取F渲校珼型周期蛋白又有、、三种亚型。根据它们在细胞周期中调控阶段不同,、/鏑、狢【。贛晚期和早期开始表达并逐渐积累,在晚期含量达到最大,经过/拗频愫笾鸾ハ陆担贕砥冢抵磷畹退健稍谙赴持续表达。/、岷嫌爰せ罴癈/的结合与激活是细胞进畇期所必须的【‘刀。基因组为双链线状ǔぴ,整个基因组含有隹7旁亩框怼浚浠蛟谙赴谧B肌⒈泶锍室欢ǖ氖毙蛐裕锟煞治<纯淘缙缙和晚期琇种。病毒穿入细胞后,基因被宿主细胞因子激活并最早表达,编码两种重要的调控蛋白和。编码、鏑青岛大学硕士学位论文
基因荋鲋潮匦杌逡鞍子氩《净虮泶铩复制、细胞周期与其他容许细胞不同,在母粗朴朐鲋得飨曰盒。浚籌芄煌ü调控、凋亡等方面有重要关系。可作用于自身启动子,抑制自身基因的表达【。能够调控蚝蚅基因的表达,而且其磷酸化水平对病毒的时序表达有重要影响【】。可反式作用于宿主细胞基因而调控其表达水平,进而改变宿主细胞的生化和生理状态,促进病毒的增殖和病毒性疾病的发生和发展【】。通过作用于肿瘤抑制基皃和、细胞周期正调控剂,阻延细胞退出细胞周期,创造一个有利于粗频南赴诨肪常┳陨砝茫淳赫砸种扑拗飨赴腄合成【】。人视网膜有两道天然防御屏障,即内外层血.