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海洋微生物低温β半乳糖苷酶筛选、克隆及性质研究.pdf

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海洋微生物低温β半乳糖苷酶筛选、克隆及性质研究.pdf

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海洋微生物低温β半乳糖苷酶筛选、克隆及性质研究.pdf

文档介绍

文档介绍:1
p质研究coldadapted[I-galactosidase学科名称:生物化学与分子生物学专业名称:究王国祥指导老师:焦炳华教授刘小宇副教授培养单位:第二军医大学基础部Screeninggeneenzymatic研生:OcloningandstudyL
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t互司详互、群111I/学位论文使用授权书声明独创性声明12卜冢篈年,月》一kr}={期:如年歹月卸只特别加以椿琏尊滦坏牡胤酵猓畚慕肀野軯£他人已经发农域擦’弓过的研究成果。与我一同鞯耐聚跄狙芯克盏娜魏文尴拙阎桑郝畚膄作了明确的说;羽弦表示{本人完全了解第二军医大学材荧像臂、使用学位论文的规定,第二坼暖大学脊权镍翻并っ萍矣泄囟济呕蚧寡宦畚脑细从〖偷缬璋妗T市砺畚乃异统崮玼岱q数搬隆》、、‘编学能论文。求人声咧所譬交豹学能论文是我个人拄导师桁导”判械膡縏作。除了文中学位论文馆者签名:学住论文佟嚣接名:闩期:,
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录目130前79第二部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第三部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘/结U0
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,对本实验分别以蚿为载体,通过分子克隆方法,构建得到重组质粒海洋的生态环境与陆地不同,具有高盐、高压力、低温和温度变化缓慢的特点。因此,来源于海洋微生物的酶往往具有特殊的酶学性质,例如作用温度低以及对大多p和实验结果如下:0004XGal2Zobell室保存的海洋微生物菌株进行了肴樘擒彰傅纳秆。不竦l再通过虷懈瓷福詈笱《ň闔sp$⒔停凭玫酱置敢汉笤倬璓亲和柱、CaptoDEAECapto恳趵胱咏换恢蚐分子筛纯化后,获得电泳纯的鞍祝炕妒倍,。虻腛为bpGenbank67pET32a(+)BGalHpSP72BGalHpSP72BGalHBGalHpET32a(+)BGalHEcoli,用诱导转化菌大量表达重组鞍俨捎肗’缀喜阄龊虲弱阴离rBGalH146245323SDSPAGErBGalH63kDaNativePAGErBGalH130kDarBGalH13-11)essionNoCP00288
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rBGalH70C12Halomonas500C1h55Fe2+(21882)Cu2+(5084)h糖分解产物;在反应hsp$6213ppH宽、热稳定性好,低温下活性高,耐受的金属离子较多,是一个更适合于在复杂体系中水解乳糖的酶。相信再经过进一步的细致研究后,它将有可能作为一种新的外源性BD2
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p-galactosidaseHalomonas,2lactose)binantQB甋producingFeP040004XGal琀2Puthesp$62andSephacryl%.BGalHspecialecosystemhighsalthigh-pressurelowtemperature猚猻瑆differsgreatlyterrestrial瓸thisenzymesmay,,Using1solidculturegyeasthadconservedbefore3strainspositiveUsingTLCforsecondarywasfurtherstudyFollowing,瑃crudethroughPABTGsaltingoutCaptoiongelfiltrationTheelectrophoreticallyyieldsuggestedbioactivedimericproteinbecausemolecular琱,—.
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