文档介绍：中国农业科学院
博士学位论文
微生物来源36家族α-半乳糖苷酶的基因克隆与性质研究
姓名:曹雅男
申请学位级别:博士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:姚斌
20080601
,是一种外切糖苷酶,催化移除不同底物中拥哪┒。弘半乳糖苷酶在医疗、食品、化工及饲料等方面有着广泛的应用。在饲料工业中。肴樘擒彰柑砑蛹潦侨コ蛊芍恤半乳糖苷寡糖类抗营养因子的首选方法。饲用、卜乳糖苷酶的生产目前尚未形成产业化,其中,性质优良的话肴樘擒彰傅姆⒕蚴且桓鲐酱饩龅墓丶侍狻本研究通过对菌种新颖性和产酶能力的评估,确定了根霉半乳糖苷酶基因克隆与表达的相关报道。链霉菌和欠掷胱曰鹧嫔降个菌株,生长条件利用生物信息学的方法,对微生物来源糖苷水解酶家族的话肴樘擒彰感蛄薪斜榷院头析,总结该家族的酶蛋白在分子量大小上的差异,进行分类、分析和简并引物设计,通过简并扩增得到来源于研究菌株中编码话肴樘擒彰傅幕蚱希俳岷喜煌幕钥寺》椒ㄗ钪栈竦这些基因的全序列。因此,%,,。,并验证其基因功能,酶纯化后进行了详细的酶学性质研究。鯽一半乳糖苷酶的性质比较表明,真菌来源的肴樘擒彰缸钍蕄灯较好;籋和瓾对多种蛋白酶有良好的抗性;猋具有一定适冷酶特性,这有在不同领域的实际应用价值,也为研究其结构和功能提供了良好的材料。糖苷酶与胰蛋白酶共作用降解豆粕的试验显示,其中置傅ザ雷饔檬倍伎山洗蠓忍岣甙肴樘力。%。这些酶学性质表明一虯,特别是籋猨樘擒彰猤,.、赤霉.、。已报道的肴樘擒彰傅陌被嵝蛄械南嗨菩浴=峁砻骼丛从诟筆的话肴樘擒彰窤最高相似性为%,赤霉腶一半乳糖苷酶瓼最高相似性为%,链霉菌的肴性,,℃,┬灾矢饕斓肴樘擒彰福唤鼍饲料添加剂中,一半乳糖苷酶常需要与蛋白酶共同作用,以提高饲料中营养物的利用率。另外,酶蛋白对胃肠道内蛋白酶的抗性,可以延长其作用时间,提高其利用效率。所获得的肴的含量。狥一一虯与胰蛋白酶共作用不影响甹樘擒彰傅慕到饽;
具有很好的饲料工业应用前景。关键词:肴樘擒彰福擒账饷易澹琑痾,基因克隆,异源表达,性质比较.,.,,
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~醚嗜穆夥嘈护黟独创性声明关于论文使用授权的声明扪Ⅷ√时间:锄牌石月古船加孙C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵\本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。签作说明并表示了谢意。研究生签名:年者名文师:,■■瘛瘛鯻
甊’7从Φ孜锓肿又械脑鬜’可以是脂肪族或芳香族基团,疧反应的配糖体话闶撬饩第一章引言话肴樘擒彰傅难芯拷话肴樘擒彰傅睦丛樘擒彰猤,,是一种外切糖苷酶。催化移除不同底物中伐一连接的末端非还原性话肴樘牵浯呋姆从θ缦峦图说明此酶既可以水解一系列简单的Ⅱ一猨樘擒眨部梢运飧丛拥腶一半乳糖苷类分子,如寡糖类、多糖类;除此外该酶还可以把Ⅱ一话肴樘腔谢R频讲煌聂腔嘌苌锷霞醋L腔从等,R虼怂芩饷鄱恰⒚拮犹恰⑺。通过对洳半乳糖苷酶的研究表明,该酶无论是在种子萌发、人类的血型转换、还是在饲料、制糖、食品和医药上业等领域具有广泛的应用前景,因此研究话肴樘擒彰妇哂惺种匾5囊庖濉肴樘擒彰浮弧胺捍嬖谟诙铩⒅参铩⑽⑸