文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
细胞PPARγ表达的研究
姓名:周博文
申请学位级别:硕士
专业:内科学(内分泌及代谢病)
指导教师:袁刚
2011-05
华中科技大学硕士学位论文
激活 Wnt 通路促进 NIT-1 胰岛β细胞
PPARγ表达的研究
硕士研究生: 周博文
导师: 袁刚教授
中文摘要
目的:通过体外培养干预小鼠 NIT-1 胰岛β细胞,观察 Wnt 信号通路对过氧化物
酶体增生物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)及葡萄糖
激酶(glucokinase,GK)表达的调节作用,并探讨 Wnt 信号通路与 PPARγ在β细胞
中的复杂对话。
方法:重组 Wnt3a 蛋白干预体外培养的小鼠 NIT-1 胰岛β细胞,荧光定量 PCR
及 Western Blot 方法检测 PPARγ mRNA 及蛋白水平较对照组的变化,并给予 Wnt 通
路阻断剂 dickkopf 1(DKK1)及 PI3K/Akt 通路阻断剂 wortmannin(Wort),比较 PPARγ
的表达量的改变。PCR 法检测各干预组(对照组、Wnt3a 组、Wnt3a+DKK1 组、
Wnt3a+Wort 组)GK mRNA 的表达。
结果:细胞 Wnt 信号通路激活,PPARγ mRNA 水平较对照组增加了 %±%
(p<),蛋白表达较对照组增加了 %±29%(p<),GK 的 mRNA 水平较对
照组增加了 65%±%(p<)。DKK1 阻断 Wnt 信号通路后,明显抑制了 PPARγ
与 GK 的 mRNA 表达,PPARγ的蛋白水平亦较 Wnt3a 干预组降低了 %±%
(p<),激活 Wnt 通路同时以 Wort 阻断 PI3K 通路,发现 PPARγ与 GK 的 mRNA
水平下降,PPARγ的蛋白水平亦较单纯 Wnt3a 干预组降低了 %±%(p<)。
同时阻断 Wnt 及 PI3K 通路时,发现 PPARγ的蛋白水平下降的更为显著,较 Wnt3a
组降低 %±%(p<),作用较单阻断 Wnt 或 PI3K 信号通路时更明显(p<)。
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华中科技大学硕士学位论文
结论:1. 在小鼠 NIT-1 胰岛β细胞,激活 Wnt 信号通路,能够上调 PPARγ及 GK
的表达,影响细胞胰岛素分泌功能;2. Wnt3a 对 NIT-1 细胞 PPARγ的刺激作用部分依
赖于 PI3K/Akt 通路的作用。
关键词:Wnt PI3K PPARγβ-catenin TCF7L2 Akt GK
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华中科技大学硕士学位论文
Studies on the Effects of PPARγ Induced by Wnt Signaling
Pathway in NIT-1 β Cell
Postgraduate: Zhou Bowen
Tutor: Prof. Yuan Gang
Abstract
Objective: To study the effect of peroxisome proliferator-activated receptor γ(PPARγ)
and glucokinase(GK) induced by Wnt signaling pathway in mice NIT-1 pancreatic β cell,
and to explore the interactional roles between PPARγ and Wnt signaling pathways.
Methods: Wnt signaling pathway can be activated by binated Wnt3a protein
and blocked by dickkopf 1(DKK1), and phosphatidylinositol 3 kinase (PI3K) signaling
pathway can be blocked by wortmannin(Wort) in NIT-1 cells. Cells were divided into four
groups according to differ