文档介绍：上海大学
硕士学位论文
耐盐模式植物盐芥(Thellungiella halophila)花时相关基因
的克隆与功能研究
姓名:方巧云
申请学位级别:硕士
专业:生物化工
指导教师:许政暟;宋任涛
20060501
要摘和弼皿删橇礁鼍龆ǹ;ǖ闹饕N坏恪U饬礁龌蛑械南孕缘任换蛐利用同源基因克隆策略,我们首次从盐芥中克隆到凡蜕就椿颍名为砀凡⑺澜牛锹胶欧直鹞狝虳Tシ睠序列全长为腛,。其中凡襌噝删鼶腸瞔盐芥,爸菘诶過口妇愿哐巍⒌臀碌妊峡岬淖匀换肪秤泻芮康哪褪芥凡虵肼同源基因的克隆入手,分析这两个基因在植物开花调控功能上的保守性。并在盐芥中对孤儿辛嘶蚬こ萄芯俊诤桓的脖嗦个氨基酸。经同源比较发现,砌凡氨基酸序列与拟南芥凡耐葱晕%,并且包含有保守结构域。对于砀凡颐欠直鸾辛艘韵卵芯俊J紫龋鄄炝舜夯泶俳谓婵花与%凡泶锪康墓叵怠Mü齆咏患觳夥⑾郑谓婢周左右的春化处理后,孤儿泶锪棵飨韵陆怠1砻鞔夯种蒲谓嫱砘ㄓ朐シ睠表达下降是同时我们构建了由娜贩睠表达载体,通过农杆菌转化兕拟南芥,进行砌凡δ芑ゲ故笛椤W;蛑仓昕梢猿晒Σ钩ツ饽辖嬖花表型。检测发现,转基因植株%凡谋泶锩飨蕴岣摺1砻髌龇睠在性,同时又符合作为遗传研究模式系统的大部分标准,是研究植物抗逆境胁迫的一种宝贵的自然资源。但是盐芥的生活周期很长,从播种到开花大约需要个月,经过茏笥业拇夯砗螅渖钍凡拍芩醵痰—鲈隆Q谓婀さ纳期以及对春化作用的强烈依赖,不仅带来操作上的不便,而且严重制约了盐芥遗传分析的进程。近年来模式植物拟南芥开花机理的研究取得了突破性进展。至少有个以上同作用造成晚花,晚花表型可完全被春化作用抑制。到目前为止,盐芥开花调控机制的研究很少。为此,我们借鉴拟南芥春化作用途径花时调控分子机制,从盐砌,序列全长为,内含一个~致的。这与拟南芥中的情况相同,说明盐芥中存在着与春化处理促进拟南芥开花相似的分子机制。上海大学硕士学位论文
片段的导入可以完全抑制内源眦的表达,转基因株在不依赖于春化处理的条菌转化,一饽辖妫衅鼋殴δ芑ゲ故笛椤=峁⑾郑;蛑仓曛荒部分补偿拟南芥早花表型,检测结果表明,转基因植株砌脚的表达明显提高。这可能与%朋,和爿蛄型葱越系陀泄兀得髌鯢脬輟删在功序的早花盐芥,为加速盐芥耐盐机制的研究奠定了基础。通过外源表达砌脚,关键词:盐芥弛咒恐埃夯饔萌ǔ寺缁明乃兕丝刂瓶;ㄊ奔渫猓赡芑褂跋熘参锲渌姆⒂形!为了缩短盐芥童期、提早盐芥开花,我们对砌凡辛嘶虺聊芯俊J先构建了謈的基因沉默载体,通过花浸染法转化盐芥,成功获得了株转基因苗,转基因盐芥呈现明显的早花现象。通过分析发现,双链豫凡%儿谋泶锖凸δ芊治鋈分じ没蛟谘谓婵;ǖ骺毓讨芯哂兄匾5墓δ堋M过技术抑制砌凡谋泶铮嘤霾灰览涤诖夯砑茨芷舳撤⒂进化过程中功能的保守性。同时,我们发现转基因植株出现了一些异常表型,表件下,开花时间由原来的个月缩短到鲈拢艺庑┰缁ㄑ谓嬉悦系露糯定律显性遗传簧ナ涓哐文褪苄浴8醚芯靠晌D脱位频难芯刻峁┮桓更便利的模式。另外,我们在实验中构建了由嫩皆聈表达载体,通过农杆能上还存在~定的差异。综上所述,本课题首次从盐芥中克隆到两个花时相关基因全长,对能够相应推迟拟南芥的开花时间,但其具体功能仍有待于进一步研究。上海大学硕士学位论文\
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签名:乏啦日期:日期:卅原创性声明本论文使用授权说明本人声明:所呈交的论文是本人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已发表或撰写过的研究成果。参与同一工作的其他同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解上海大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留论文及送交论文复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可C艿穆畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑以公布论文的全部或部分内容。上海大学硕士学位论文
第一章文献综述参锟;ǖ姆肿拥骺餾瑂官——花。这是无性发育与有性发育的一个转化点。这种开花转型从发育分化的开