文档介绍：上海交通大学硕士论文中文摘要
ICBP90 表达及其对胆囊癌细胞化疗敏感性影响的研究
摘要
目的通过检测生长抑素作用后胆囊癌细胞内 ICBP90 蛋白表达的变
化,探讨生长抑素增强胆囊癌细胞对阿霉素化疗敏感性的分子机制。
方法(1)选取人胆囊癌细胞株 GBC-SD,常规体外培养,并验证
其成瘤性及病理组织类型;GBC-SD 细胞分为 4 组:单独生长抑素作用
组、单独阿霉素作用组、联合用药组(生长抑素预处理 24h 后,再加入
阿霉素)和对照组。(2)在药物作用 24h,48h,72h 和 96h 后,采用 MTT
方法检测各组细胞生长曲线。(3)在药物作用 24,36,48 和 60h 后,采
用 Annexin V/PI 方法分别检测各组细胞的凋亡情况;(4)在生长抑素作
用 12、24、36 和 48h 后,采用流式细胞仪检测 GBC-SD 细胞内 DNA 的
含量,确定各时间点细胞所处周期。(5)采用 western blot 方法检测在生
长抑素作用 12、24、36 和 48h 后 GBC-SD 细胞内 Rb、E2F-1、ICBP90
和 Topoisomerase Ⅱα各蛋白的表达变化,以及在生长抑素作用 24 后
GBC-SD 细胞内 P53 和 Bax 蛋白表达的变化。
结果(1)GBC-SD 细胞在体外常规培养,生长旺盛;裸鼠接种 4
周后可见明显荷瘤,病理切片镜下见腺癌组。(2)对 GBC-SD 细胞联合
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应用生长抑素和阿霉素,可明显抑制胆囊癌细胞的生长,并呈现浓度-效
应依赖关系,对癌细胞的杀伤作用明显强于单用阿霉素组(P<)。(3)
联合用药组和单独阿霉素作用组出现明显的细胞凋亡(P<),而且细
胞凋亡具有时间依赖性的,其中联合用药组的细胞凋亡更显著(P<);
而单独生长抑素组却没有出现明显的细胞凋亡(P>)。(4)在生长抑
素作用后,GBC-SD 细胞出现明显的 S 期阻滞(P<),并且 S 期细胞
比例在 24h 达到高峰,随后逐渐降低。(5)生长抑素作用 12h、24h 和
36h 后,各蛋白表达变化情况如下:Rb 和 E2F-1 蛋白表达增多,在 12h
达到高峰(P<);ICBP90 蛋白的表达增多,在 24h 达到高峰(P<);
而 Topoisomerase Ⅱα蛋白的表达也增多,在 24h 达到高峰,随后保持一
平台(P<)。另外,生长抑素作用 24h 后,P53 和 Bax 蛋白的表达无
明显变化(P>)。
结论生长抑素增强阿霉素对胆囊癌细胞的杀伤作用,并非是由生长
抑素与阿霉素本身的细胞毒性作用叠加所致,而与生长抑素影响胆囊癌
细胞的周期和细胞内 Topoisomerase Ⅱα蛋白的表达有关。生长抑素诱导
胆囊癌细胞发生 S 期阻滞,可能与其改变细胞内 Rb、E2F-1 蛋白的表达
有关;而 Topoisomerase Ⅱα蛋白表达的增高则与生长抑素诱导 ICBP90
蛋白的上调有关。
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关键词: 胆囊癌,化疗敏感性,生长抑素,细胞周期,ICBP90
上海交通大学硕士论文英文摘要
RESEACHES ON THE EXPRESSION OF ICBP90 AND
ITS EFFECTS ON CHEMOSENSITIVITY OF GBC-SD
CELL LINE
ABSTRACT
Objective To investigate underlying molecule mechanism of somatostatin
enhancing chemotherapy sensitivity of GBC-SD cells to doxorubicin
through examining expression alterations of ICBP90 protein in GBC-SD
cells after treated with somatostatin.
Methods (1) GBC-SD cells were routinely cultured and its
tumor-formation potential and the pathologic types were validated by
xenografts in nude mice. GBC-SD cells were divided into four groups:
Somatostatin-alone-trea