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聚合转基因TsVP和betA提高玉米抗逆性研究.pdf

上传人:2024678321 2014/6/26 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:符号说明籔旷·鸩思钊┩亚饷喽院,乙酰乳酸合成酶ㄒ嘶ㄒ恫《,苯甲基磺酰氟饫胱咏沽姿崦榛谆寤ゲ笵芍,乙二胺四乙酸促分裂原活化蛋白激酶培养基,聚合酶链式反应凳庇ü舛縋榛撬崮趸锲缁羌谆被淄衩追核鼗虻钠舳ḿ钔亚饷ḿ畹パ趸ḿ钛趸馗咝手.—ù笱妒垦宦畚
论文作者签名:锰耋芙导师签名:难期:醴堕』论文作者签名:翘垒轰期:坦后茫豪立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本声明关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独的法律责任由本人承担。
聚合转基因和提高玉米抗逆性的研究中文摘要以非转基因自交系为、野生型哉眨宰猙晗岛妥J价涞随着世界人口的增加和水资源亏缺以及耕地面积的日益减少,开发利用干旱地和盐碱地越来越重要。已报道的提高植物对非生物逆境抗性的基因工程大多数是将单个目的基因转入植物获得工程植株,但转基因植物抗逆性增加水平仍有待提高。一般认为植物的抗逆性是由多基因控制的,所以多基因组装与转化技术便应运而生。将多个目的基因导入到植物基因组中并在植物中进行表达的策略之一为转基因聚合法,即先用不同基因转化两亲本,获得转基因稳定纯合系后进行杂交,聚合双亲的转基因。该途径虽比较费时,但与同时转入多基因相比,转基因表达相对稳定,易获得多个转基因高效表达的遗传修饰体。本实验以将分别含有蟪Ω司谋嗦氲ḿ钔亚饷傅幕和芥的编码焦磷酸酶的基因虻淖;蛴衩字仓来自自交系咏唬得到含有和始汐基因的玉米植株为材料;通过觳夂蚐咏确定了目标基因在杂交植株中存在,并利用检测肯定了两个目标基因在转基因聚合植株中稳定表达。从转基因聚合的代株系中选取基因聚合株系,株系分别为转单基因对照,在严格控制条件下进行抗旱耐盐性检测试验。转基因聚合植株的抗旱性分析种子分别播种在大小一致的花盆中,在植株叶期时开始进行干旱胁迫处理,每天控制浇水量,使其土壤相对含水量保持在.%左右,持续处理天,然后恢复正常浇水珊灯诩浔苊饬苡。在干旱处理期间,转基因聚合植株两个目的基因的转录本丰度都明显高于转单基因株系的。干旱胁迫处理后,转基因聚合植株和转单基因植株以及野生型对照植株在株高、雄穗分支数、开花散粉时间、散粉一吐丝间隔时间、花粉活力、果穗长度、百粒重等性状均出现差异。野生型植株雄穗分支数少、雄蕊发育不良、花粉败育、、单株籽粒产量低,而转基因聚合植株表现出显著提高的耐旱性,花粉发育基本正常,单株籽粒产量明显高于转单基因对照株系,大幅度高于野生型的。即转基因聚合植山东大学硕士学位论文.
株在干旱处理过程中表现明显增强的抗旱性,生长发育正常。生理测定结果显示:转基因聚合植株叶片相对含水量在干旱胁迫处理中降低速率低于同条件下的转单基因植株的,即保水能力较强,可溶性糖及脯氨酸含量也明显高于转单基因植株,即转基因聚合植株细胞的溶质势更低;离子渗漏率和丙二醛含量表明转基因聚合植株在干旱胁追处理中叶片细胞膜损伤较小。这些结果表明基因聚合植株在干旱胁迫下可以通过积累更多的渗透保护性物质来维持正常代谢,使植株在干旱胁迫下受损程度轻,与转单基因植株相比具有更强的抗旱性。转基因聚合植株的耐盐性分析将不同株系的种子播于沙盆后分别浇灌不同浓度的盐水,连续浇灌天,统计出苗率和小苗成活率。转基因聚合植株的种子在高浓度下出苗率高,小苗在盐胁迫处理中存活率和植株长势要好于转单基因植株的,生物量也明显高于转单基因植株的,细胞虲:棵飨蕴岣撸荎虲浠淮螅明转基因聚合植株可以更有效的促使谙赴械那艋佣跎俟康灾参锵赴纳撕Α6匀芤号嘌男∶缃辛四脱涡苑治觯⑾衷谘涡财却理条件下,转基因聚合植株长势优于转单基因植株的,叶片离子含量和丙二醛含量较低,叶绿素含量降低速率小于转单基因株系的。转基因表达产物检测表明,在盐胁迫条件下,转基因聚合植株的目的基因的表达产物的丰度分别高于转单基因株系的,推测两个目的基因的共存产生协同效应,使转基因处于一个相对适宜的环境中实现稳定表达,从而提高植株的耐盐性。综上所述,和双基因在玉米中共表达,有效提高了转基因玉米植株的抗旱耐盐性。在干旱胁迫下聚合植株能够通过无机离子和有机溶质的大量积累维持较低的溶质势,从而有利于植物细胞维持膨压,保持水分,免受干旱胁迫的伤害。在盐胁迫条件下,基因可增强在液泡中储存哪芰Γ佣苊了细胞质中过量的韵赴纳撕Γ鴅蛟黾恿讼赴拾彼崽鸩思