文档介绍：缩略词嗾厦富嗾献超广谱届内酰胺酶J囟嗾厦富蛏嫌我嗾厦富蛳掠我嗾献由嫌我嗾献酉掠我猯疌痗籉籖
嗾献佑氪蟪ΠOJ暇嘀啬鸵┬缘难芯目的监测大肠埃希菌临床分离株的耐药性,了解大肠埃希菌中嗾献拥拇在频率,以及基因盒的种类和排列,分析细菌携带基因盒与耐药表型的关系以及嗾献佑氪蟪ΠOJ暇嘀啬鸵┬缘墓叵担教终献右灰换蚝邢低辰榈和传播细菌耐药性的分子机制。方法利用全自动细菌分析仪,对甏蟪ΠO>俅卜掷胫杲腥啡稀⒉鶨判读和种抗生素敏感性测定,纸片扩散法对另外挚股亟忻舾行圆舛ǎ应用椒ǎ┰鲋柿上嗾厦富,并对阳性的标本进行嗾嫌睦┰觯欢源笮∠嗤腎类整合子进行酶切分析;对纯化后的嗾献咏蠨测序,将蛄性贕中搜索,确定嗾献涌杀区基因盒的种类和排列。结果细菌对种抗生素的耐药率超过%,耐药率高的抗生素包括氨苄青霉素%⒏捶叫屡得%⑼锋咔%⑶齑竺顾%龋株%妇鶨,株%妇6嘀啬鸵┚耐受忠陨峡股。在株细菌的质粒霞觳獾絀类整合酶基因阳性,整合酶基因阳性的菌株扩增嗾献拥肗株阳性,大小约,株细菌各含鯥类整合子。细菌的多重耐药率与嗾献拥难粜月蚀嬖谙喙亍4笮∠嗤腎类整合子有相同的酶切图谱,据此认为它们有相同序列。整合子中最常见的基因盒为甲氧苄啶耐药基因疵顾亍⒆彻勖顾啬鸵┗,最主要的基因盒排列为籥。携带甲氧苄啶耐药基因盒的绝大多数菌株对复方新诺明耐受,携带链霉素、壮观霉素耐药基因盒的大多数菌株对链霉素不敏感。结论大肠埃希菌临床分离株的耐药性强,嗾献釉诖蟪ΠO>泄惴捍嬖冢耐药基因盒与甲氧苄啶、早期使用的氮基糖苷等传统抗生素有着密切的联系,菌株携带基因盒和耐药表型之间有较好的对应关系,基因盒介导了细菌耐药性。关键词:大肠埃希菌整合酶整合子基因盒耐药性【摘要】
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前言抗生素在临床、社区和食源性动物上的广泛使用,造成耐药菌株尤其是多重耐药菌株在世界范围流行“O妇鸵┬酝ǔS苫竦媚鸵┗蛞穑诳股匮择性压力下,耐药基因的水平传播是一个日益严重的问题,耐药基因的水平传播使耐药菌株广泛流行。’保甋戎暾教岢隽苏献换因盒低车母拍睿献映N挥谥柿!⒆W由希沟谜献整合子是含有位点特异重组系统和基因盒的遗传结构,也是一个基因盒整合和切除系统,包括对基因盒的捕获、切除和表达”一。整合子根据整合酶的不同而分类,目前,己发现类整合子,其类整合子含有耐药基因盒州,至少己发现了多种基因盒,新的基因盒还在不断被发现嘲,基因盒含荒邗0防唷头孢类、氨基糖苷类、甲氧苄啶,氯霉素、磺胺类等抗生素耐药基因嘲。在已发现的整合子中,绝大部分是嗾献印类整合子的基本结构由分组成∞,两端是高度保守序列,分别称作J囟痗和J囟疌,疌’之间的区域称作可变区。痏端含启动子健R约氨嗦胛坏闾匾熘组酶的整合酶基因涸鸫呋蚝械恼虾颓谐购幸桓鲋刈槲点?杀淝梢桓龌蚨喔龌蚝凶槌桑蚝邪ǖ鞍妆嗦肭椭刈槲坏。痗艘话愫个开放读码框,分别为季铵盐化合物和溴乙锭耐、磺胺耐药基因以及功能不明的开放读码框。研究发现,在临床分离的革兰阴性耐药菌株中,整合子的出现频率高于%“”。整合子在耐药基因的传播中起着重要作用,使得耐药细菌的数量和细菌耐受抗生素的种类迅速增多。大肠埃希菌是引起人类感染最常见的肠杆菌科细菌““,其耐药形势十分严峻,此外,作为动物和人类肠道中的正常菌群,是耐药基因的重要储存库,在耐药基因的传播中发挥着重要的作用。细菌耐药性已经成为人类面临的一个公共卫生问题,治疗耐药菌引起的感染变得日益棘手,抗生素治疗效果下降甚至无效,治疗时间延长,治疗费用增加。因此,对细菌耐药性的监测,以及在分子水平研究细菌耐药性的产生和传播显得十分必要。目前,省内缺乏对大肠埃希菌临床分离株中整合子一基因盒系统的研究。本课题针对从福建省立医院不同科室各种标本分离的甏蟪ΠO>可以随质粒、转座子在细菌种内和种间广泛传播薄受基因
测细菌的耐药性,采用椒ḿ觳釯类整合酶,分析了嗾献拥拇嬖谄德剩并对嗾献友粜缘木杲心鸵┗蚝蟹治觯教终献右换蚝邢低辰榈和传播细菌耐药性的分子机制,为指导合理使用抗生素,控制细菌耐性的发展提供理论依据。
材料与方法四环素,峙/片⒙让顾遥、链霉素,烬/片牧甏蟪ΠO>轮拢痈=ㄊ×⒁皆焊骺剖也煌∪肆床标本中分离,菌株来源:尿液株,痰株,全血辏置谖株,胆汁辏腹腔引流液辏顾株,脓液辏浩渲株来源于住院病人,昀丛从诿诊病人。标准菌书苫D侠砉ご笱峁び胧称费г菏诮淌诨菰〉ジ鼍落于高压过的带滤纸的苤校保存。腿妊芬珠海黑马医学仪器有限公司—一退降缬疽上海复星高科技集团有限公司—型紫外透射仪虾3っ鞴庋У缫瞧鞒一型电热恒温水槽虾>ê晔笛樯璞赣邢薰一托谢旌掀姜堰市新康医疗器械有限公司型低温高速离心机楹:诼硪窖б瞧饔邢薰紫外线分光光度计疨凝胶成像系统离心机水浴箱本┲行宋耙狄瞧饔邢薰全自动细菌分析系统药敏