文档介绍:声明指导教师:幻钧申请人:承渤文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的,论文成果归四川大学所有,特此声明。一
健康人肠道大肠埃希菌耐药性及其耐药基因播散机制的研究中文摘要目的方法四川大学硕士学位论文华西公共卫生学院营养与食品卫生专业硕士研究生;张弘导师:刘衡川副教授贺雄主任医师指导小组成员:陈丽娟主任检验师测定北京地区健康人肠道大肠埃希菌耐药水平和特征;研究整合子和耐药基因盒在健康人群肠道大肠埃希菌中携带情况及分布特点,探讨耐药基因盒与细菌耐药表型的关系;了解整合子在不同基因型菌株中的分布,以及整合子在耐药性水平传递中的作用和分子机制。利用全自动细菌鉴定/药敏分析仪,对从健康人肠道分离的甏肠埃希菌进行鉴定,种抗生素敏感性测定和产卸粒硗种抗生素用纸片扩散法进行敏感性测定;对两种药物敏感性方法进行平行实验比较结果符合率;采用椒ḿ觳庀妇鳬、Ⅱ类整合子的情况,通过限制性内切酶分析,纯化测序,将不同大小嗾献拥腄序列在中搜索,确定其可变区基因盒的种类;利用脉冲场凝胶电泳对大肠埃希菌进行分子分型:通过质粒接合试验研究嗾献
结果结论四川大学硕士学位论文水平传递现象,并联合斑点杂交试验对嗾献咏卸ㄎ环治觥杲】等顺Φ来蟪ΠO>猿S每股卮嬖谀鸵┬裕鸵┞矢叩抗生素包括四环素%⑤拎に.、甲氧苄啶%⒒胺%避形髁.;%妇鶨畇,株%细菌为多重耐药菌褪种以上抗生素蝗ú烤甓匝前放嗄希锋吡肟与头孢替坦敏感;%笮∥种条带,其中晗妇辛礁鯥类整合子,未检测到Ⅱ类整合酶。大小相同的嗾献用盖型计滓恢拢荽巳衔K怯邢嗤蛄校整合子中最常见的基因盒为甲氧苄啶耐药基因疵顾一壮观霉素耐药基因钪饕5幕蚝信帕形猟。携带甲氧苄啶耐药基因盒的菌株只有甓愿捶叫屡得髅舾校疵顾匾蛔彻勖顾耐药基因盒的大多数菌株对链霉素耐受。细菌多重耐药率与整合子携带情况与年龄不相关。可被分型的株大肠埃希菌中,只有菌株⒕,嗾献涌纱嬖谟谕只虿煌蛐途曛小T谥柿=雍鲜匝橹校有%昃獻类整合子成功传递给受体菌,耐药表形也相应传递,证明耐药质粒含有嗾献樱莅叩阍咏皇笛榻峁挥谌旧搴非接合性质粒的整合子分别为旰株。北京地区健康人肠道大肠埃希菌耐药情况比较严重,细菌多重耐药率和嗾献拥拇嬖诿芮邢喙兀肽炅浞植济挥泄亓!>晷蚝泻虸
关键词:健康人:大肠埃希菌;药敏试验;整合子;基因盒;脉冲场凝四川大学硕士学位论文耐药表型之问有较好的对应关系,耐药基因盒种类与抗生素使用的时间与广度有关。整合子一基因盒介导细菌耐药性,基因分型与质粒接合试验证明整合子可在细菌种内进行水平传播。首次获得整合子一基因盒在健康人大肠埃希菌中的分子流行病学资料,为合理解释临床致病菌与食源性致病菌多重耐药性的快速扩散提供理论支持。进一步探讨整合子介导和传播细菌耐药性的分子机制,丰富补充整合子一基因盒体系,为指导合理使用抗生素和预防细菌耐药性的产生与传播提供了可靠依据。胶电泳;质粒接合;斑点杂交
:海瓵......
..%%..,%.加./甀..,
四川大学硕士学位论文..丸,甌籈籔;籇..,;籫甌甌..。
健康人肠道大肠埃希茵耐药性及其耐药基因播散机制的研究前言四川大学硕士学位论文抗生素滥用是细菌耐药性产生与扩展的直接诱因,多重耐药的致病菌引起感染性疾病在全世界范围内造成巨大危害,已成为严重的公共卫生问题。目前,细菌的多重耐药现象不仅局限于临床病原菌和食源性致病菌,已扩展到家畜家禽等动物源性和健康人的肠道大肠埃希菌。在强大的选择性压力下,┲柿:妥W拥难芯恐蟹⑾值模整合子具有俘获、切除和表达耐药基因盒的功能,常插入到接合性质粒或转座子中,在细菌种内和种问广泛传播。整合子的基本结构由三部分组成,两端是高度保守序列,之间的区域称作可变区,由一个或多个基因盒组成。整合子能捕获游离抗性基因盒,使细菌对某些抗生素产生耐药性,甚至多重耐药性,整合子是天然的克隆和表达载体。目前已发现了多种基因盒,对荒邗0防唷⑼锋呃唷基糖苷类、甲氧苄啶、氯霉素、磺胺类等抗生素表达抗性,,有嗾献佑细菌多重耐药性密切相关。国外研究报道,在医源性感染的肠杆菌科细菌