文档介绍:实验十五血清丙氨酸氨基转移酶(谷-丙转氨酶)活性测定改良 Reiman-frankel 法(改良赖氏法) 目的?掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的原理并熟悉操作方法?了解测定血清丙氨酸氨基转移酶活性的临床意义相关理论?氨基酸代谢?体内蛋白质处于不断降解与合成的动态平衡?食物蛋白质经消化吸收的氨基酸和体内组织蛋白质降解产生的氨基酸混在一起,分布于体内各处,作为参与代谢的氨基酸库?氨基酸分解代谢的主要反应是脱氨基作用?肝脏的脱氨基方式有:氧化脱氨基,氨基转换作用及联合脱氨基?催化转氨基反应的酶称为转氨酶(transaminase )?肝脏中含此种酶较为丰富?谷氨酸-丙酮酸转氨酶(简称谷-丙转氨酶 GPT ,ALT ) ?谷氨酸-草酰乙酸转氨酶(简称谷-草转氨酶 GOT ,AST ) ?原理血清中谷丙转氨酶作用于丙氨酸及α-酮戊二酸,产生丙酮酸和谷氨酸。?丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼反应,生成丙酮酸- 2,4-二硝基苯腙丙酮酸- 2,4-二硝基苯腙在酸性溶液中呈黄色, 加碱后呈棕红色,与标准液进行比色,以计算酶活性单位。?在一定的条件下, GPT 越多,则反应速度越快,在一定的时间内产生的丙酮酸也就越多?以丙酮酸的产量来代表 GPT 活性的大小?丙酮酸的生成量与溶液颜色的深浅, 即与 GPT 活性的高低成正比关系?通过与标准液进行比色,以计算酶活性单位操作?制作标准曲线?血清 GPT 活性测定