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Ⅰ群禽腺病毒核酸检测方法及DNA疫苗研究.pdf

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文档介绍:一疆曩笱戛譬至客薹薹≥厂零≯。噶,· 呵菹俨《竞怂峒觳夥椒ḿ癉疫苗的研究唐熠硕士学位论文论文答辩日期生鱼目目答辩委员会主席值委苴熬援分类号墨墨主河阒鳞校学位授予日期广西科技攻关项目资助鹂乒—国家百千万人才工程专项资金资助
/疘/嬲炒:⋯撇:痢⋯名褥拶舢年占月叫日力年埂跴、少广西大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明学位论文使用授权说明本人声明:所呈交的学位论文是在导师指导下完成的,研究工作所取得的成果和相关知识产权属广西大学所有,本人保证不以其它单位为第一署名单位发表或使用本论文的研究内容。除已注明部分外,论文中不包含其他人已经发表过的研究成果,也不包含本人为获得其它学位而使用过的内容。对本文的研究工作提供过重要帮助的个人和集体,均已在论文中明确说明并致谢。本人完全了解广西大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存学位论文的印刷本和电子版,并提供目录检索与阅览服务;学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文;在不以赢利为目的的前提下,学校可以公布论文的部分或全部内容。口即时发布口解密后发布C苈畚男枳⒚鳎⒃诮饷芎笞袷卮斯娑论文作者签名:请选择发布时间:。..,●卜,、、√崎●
呵菹俨《竞怂峒觳夥椒ḿ癉疫苗的研究蒋病毒质粒钚〖觳庀蘅纱拷贝/止;方法对惭返募斐摘要呵菹俨《臼粲谇菹俨《究魄菹俨《臼糁饕0鲅G逍停餮清型毒株之间含有相同的群特异性抗原,鸡胚致死孤儿病毒、鸡包涵体肝炎病毒等为呵菹俨《局薪衔3<亩局辍2煌樟涞募仪莺鸵吧窭均可感染呵菹俨《荆鸬湫偷牧俅仓⒆慈纾喊甯窝住⑵堆:蜕产能力下降,给养禽业带来极大危害。【俊利用两对引物分别对呵菹俨《镜鲅G逍投局甑膆基因的两个片段进行扩增。其中未笮∥珺片段为。通过对所扩增片段的序列和限制性酶切位点分析,选择限制性内切酶对扩增产物进行酶切片段多态性分析。结果,本研究所扩增的呵菹俨《镜个血清型毒株的目的片段,其酶切片段呈现多态性。表明该限制性内切酶能对呵菹俨《镜鲅G逍徒蟹中汀根据呵菹俨《緃基因保守区序列,设计一套特异性引物,建立了一种适用于呵菹俨《镜腖焖偌觳夥椒ā=峁砻鞲梅椒ǹ以特异的扩增出呵菹俨《镜鲅G逍捅曜级局辏怨菇ǖ腎群禽腺率高于椒ǎ辉诶┰霾镏刑砹玖虾罂赏ü庋酃鄄煊无荧光产生而对结果进行直接判定。本研究建立的方法简便、快速、灵敏、特异性高,可作为呵菹俨《靖腥镜目焖僬锒戏椒ā利用针对呵菹俨《检测的普通氤彩絇,..一、噜▲.一●
。摹只能检测到拷贝/此。结合临床疑似病料检出结果表明在实践中根据实蚅闹趾怂峒觳夥椒ǘ圆煌柿Eǘ鹊难泛土俅惨伤蒲方行检测,比较四种核酸检测方法的敏感度。并与与传统的病毒分离方法进行对比。结果四种核酸检测方法中—钗C舾校梢约觳獾贝./,与半巢式浯慰梢约觳獾×奖矗痯胀≒际情况需要选择合适的检测法对呵菹俨《进行检测是十分必要的。将呵菹俨《綜甑膆基因与鸡基因进行连接,。并将该重组质粒转染细胞,通过、免疫荧光试验对重组质粒的体外瞬时表达情况进行检测鉴定。检测结果显示,成功构建..诤匣蛑刈樵靥澹⒃赩细胞中获得表达。ü夭考∪多点注射的方法免疫三周龄Γ恐患。同时设、畃椋鸹蠲缍哉兆椋赵靥宥哉兆椋翱瞻锥哉兆椤C庖吆竺恐懿裳一次,椒ḿ觳饪固逅健S诘周进行攻毒实验,并于攻毒后的天,欤天,天采集各组鸡的肛门绵拭子,检测排毒情况。,灭活苗组的抗体水平要明显高于其它组能更好的抑制排毒。为了研究免疫呙缫院笃湓谔迥诘亩植记榭觥⒃诟髯橹某现和消失时间。,每只鸡,接种后的不同时间分别对鸡的心,肝脏,脾脏,肺,肾脏,胸腺,法氏囊,肠,接种部位肌肉以及血液采用甈和半巢式椒ń屑觳狻=~焐鲜龈髯橹鞴俾叫梢~声。¨,’’
检测到呙缏叫鱿帧以后各组织器官的呙缈J悸叫В肌肉接种部位时仍然可以检出呙纭1狙芯课狣疫苗的临床应用提供理论及数据支持。关键词:呵菹俨《緃基因核酸检测呙缣迥诜植免疫保护名卜~,鯝●
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