文档介绍：固定化酶的制备:固定化酶的制备方法

　　固定化酶制备及酶活力测定
　　试验者：张玲玲绿药1班 [1**********]6 同组者：金雨馨、管青青
　　试验日期：2021/3/13 汇报完成日期：2021/3/20
　　试验指导：易喻
　　摘要：酶的固定化技术是用固定材料将酶束缚或限制于一定区域内，酶仍能进行其特有的
　　催化反应、并可回收及反复利用的一类技术。酶活力的测定实质是测定被酶所催化的化学反应速度。本文经过包埋法对酶进行固定化，并利用福林酚反应测定碱性蛋白酶的酶活力。结果表明：固定酶能够增强酶的稳定性，数次使用，但会造成酶活力的降低。
　　关键词：固定化酶酶活力包埋法
　　Abstract：Enzyme immobilization is a kind of technology that confine enzyme to a certain area by fixed material and the enzyme can still carry out its unique catalytic reaction .Determination of enzyme activity is essentially determination of enzyme-catalyzed chemical reaction rate. In this article, we fixed enzyme by embedding and determinated enzyme by Folin phenol reaction. The result showed that enzyme immobilization can enhance the stability of the enzyme, but will reduce the enzyme activity.
　　序言：酶的固定化是用固体材料将酶束缚或限制于一定区
　　域内，仍能进行其特有的催化反应、并可回收及反复使用的一类技术。和游离酶相比，固定化酶在保持其高效、专一及温和的酶催化反应特征的同时，还展现贮存稳定性高、分离回收轻易、可数次反复使用、操作连续及可控、工艺简便等一系列优点。依据酶的性质及用途，可经过包埋法、交联法、吸附法及共价结正当来实现酶的固定化。其中包埋法是将酶包裹于凝胶网格或聚合物的半透膜微中,使酶固定化。所用的凝胶有琼脂、海藻酸盐和聚丙烯酰***凝胶等；用于制备微囊的材料有聚酰***、聚脲、聚酯等。分为网格型和微囊型两类，其制备工艺简便且条件较为温和、可取得较高的酶活力回收。测定酶活力实际就是测定被酶所催化的化学反应的速度。酶促反应的速度能够用单位时间内反应底物的降低量或产物的增加量来表示，为了灵敏起见，通常是测定单位时间内产物的生成量。因为酶促反应速度可随时间的推移而逐步降低其增加值，因此，为了正确测得酶活力，就必需测定酶促反应的初速度。福林—酚试剂是磷铂酸盐和磷钨酸盐的混合物。它在碱性条件下不稳定，能被酪氨酸中的酚基还原，生成铂蓝、钨蓝的混合物。酪蛋白在蛋白酶作用后产生的酪氨酸可和福林—酚试剂反应，所生成的蓝色化合物可用比色法测定。
　　正文：
　　
　　试剂和仪器
　　试剂
　　①海藻酸钠、%***化钙 ②碱