文档介绍:生物工程设备课程实验指导
前言
生物化工专业《综合性大型实验》是针对本专业四年级学生开设的一门独立设课的必修实验课,是专业实践性教学中重要一环。
有以往各课程实验基础上,大型实验课将使学生获得科学实验的强化训练。受到多方面更加深入、较为完整的运用所学知识,进行实践和提高动手能力的综合性锻炼。使学生不仅有较扎实的理论知识,又有较强的分析问题和解决问题的实践能力,以适应国家对培养社会主义现代化建设人才的需要。
大型实验课在内容上,把生物化学、微生物学、生物化工的专业理论与实践有机地、紧密地结合起来,成为对高年级学生进行较为全面、系统的综合训练的实验课。
要求参加实验的学生,在教师的正确指导下,经过预习准备,按实验要求,自己独立拟订实验实施方案,运用实验室条件进行操作,并写出具有一定水平的实验报告,使学生获得一次类似做科研论文的训练。
大型实验课侧重于提高学生的实践能力,,解决实验中的问题。
学生实验成绩评定,由实验操作技能、实验态度、实验报告与实验中分析问题和解决问题诸方面综合考核确定。其中实验态度与实验操作能力占50%,实验报告质量与回答问题水平占50%。
第-部分高核糖核酸含量酵母的筛选及发酵试验
(一)高核糖核酸含量的酵母的筛选
简介
核糖核酸是医药工业和食品工业调味剂的重要原科,关于微生物菌体内RNA的含量。-~%,~11%,~%。工业上生产核糖核酸主要由酵母提取制备。核糖核酸得率取决于酵母中核糖核酸的含量,因此提高酵母核糖核酸含量,是工业生产核糖核酸的关键。
一、菌种的活化及扩大培养
(一)菌种与材料:
:丹麦啤酒酵母菌、产朊假丝酵母菌等
:麦芽汁培养基
麦芽琼脂培养基
:水浴锅、烧杯、比色盘、碘液、纱布、灭菌锅、漏斗、试管等。
(二)方珐与步骤:
:液体石蜡保藏菌种
↓
麦芽汁培养基活化(三天)
↓
麦芽琼脂固体培养基(一天)
:
(l)麦芽汁的制备:干麦芽首先进行压碎。加3~4倍水,浸泡1小时,然后升温至63℃糖化4~6小时,用1/50N碘液测定为黄色至无色。用纱布过滤,可以反夏回流,直到滤液透明澄清为止,即为麦芽汁。分装后1公斤/厘米2蒸汽灭菌15分钟备用。
(2)固体斜面麦芽培养基的制备:用12巴林的麦芽汁加2%琼脂加热使溶解,然后分装于试管中(约装四分之一),放在灭菌釜中用1公斤/厘米2,121℃灭菌15分钟。灭菌后倾斜摆斜面,然后放在30℃恒温箱中使培养基上蒸汽水逐渐干燥,再置冰箱中保存待用。
:
(l)麦芽汁浓度应为11~12巴林,pH5以上,制成的麦芽汁应为淡黄色透明,无其它悬浮物质。
(2)斜面培养基需待表面蒸汽水干燥后,才能接种。
(3)制备培养基所用水份,应用自来水较好。
二、摇瓶发酵条件试验
摇瓶培养的目的有二:一是寻求发酵培养基的合适配方,二是寻找最佳发酵条件。微生物发酵法是一个受多种因素影响的工艺过程,应用一般的简单比较法很难得到满意的结果,实验室中往往采用正交设计方法,对所研究的菌种进行试验。
正交试验法是一种安排和分析试验的方法,这种方法可以通过较少的试验次数和比较简便的分析方法,获得较好的结果,它的特点是挑选一部分有代表性的试验项目,利用正交表来进行整体设计。可以同时做一批试验,减少试验次数,缩短试验周期。通过分析,它能告诉我们,哪些因索是显著因素,哪些是非显著因素,以及哪些因素同有交互作用和交互作用的大小,还能分析出试验误差的大小。
正交试验包括两部分内容,设计试验方案和分析试验结果。
(一)菌种与材料:
:同(一)
:葡萄糖、硫酸铵、KH2PO4 %、ZnSO4 %、FeSO4 %(pH ,温度30℃)
:按正交表配制培养基,确定发酵条件。
(二)方法与步骤:
,确定试验因素,影响发酵的因素很多,考虑到实验室条件及人力和时间,我们不能在一次试验中包括所有因素,本实验主要从葡萄糖、硫酸铵、通气量和发酵时间四个因素,每因素选择三个水平,采用正交表L9(34)。
,根据生产上发酵的现有了解,把葡萄糖、硫酸铵、通气量和发酵时间四个因素各分成三个水平。
:根据人力、物力、试验任务,确定因素水平后,选出正交表。表头中L表示正交表,L右下脚9表示有9行,可用来安排9个试验。括号内底数3是因素水平数,指数4是4个因素。
(表头设计),把正交表的数字代号依次换成该因素和水平的实际数字。
从正交试验结果中,我们可以得到本