文档介绍：果蔬中还原糖和总糖的测定 总糖还原糖的测定
果蔬中总糖及还原糖含量的测定
一、试验目标
1、掌握总糖和还原糖含量的测定方法。 2、学****分光光度计的原理和操作方法。 3、了解蒽***法测定可溶性糖含量的原理。 二、试验原理
总糖是指样品中的还原单糖及在本试验条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。
多糖为非还原糖，可用酸将没有还原性的多糖和寡糖根本水解成含有还原性的单糖，再利用还原糖的性质进行测定，这么就可分别求出总糖和还原糖的含量。 糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟***糖醛可和蒽***反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅和糖的含量成正比。糖类和蒽***反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm ，可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。 三、试验器材 1、材料：梨
2、仪器：分光光度计、恒温水浴锅、电子分析天平、高速冷冻离心机、容量瓶、玻璃漏斗、量筒、研钵、锥形瓶、试管、移液管、pH 试纸 3、试剂：
蒽***试剂：取2g 蒽***溶于1000mL 体积分数为80%的硫酸中，当日配制使用。 标准葡萄糖溶液：称取100mg 葡萄糖，溶于蒸馏水并稀释至1000mL 。 6mol/L HCl溶液
20% NaOH溶液：称取20g NaOH固体，溶于蒸馏水并稀释至100mL 。 四、试验操作
1、葡萄糖标准曲线的绘制：
取 6 支大试管，从 0 ～ 5 分别编号，按下表加入各试剂
以吸光度为纵坐标，各标准液浓度为横坐标做图得标准曲线。 2、样品中还原糖的提取和测定
称取1g 梨，加蒸馏水约3mL ，在研钵中磨成匀浆，转入三角烧瓶中，并用约12mL 蒸馏水冲洗研钵2～3次，洗出液也转入三角烧瓶中。于50℃水浴中保温约30min ，取出置于离心管内，5000r/min离心10min ，冷却后定容至100mL 。
吸收1mL 滤液置于试管中，浸于冰浴中冷却，再加入4mL 蒽***试剂，沸水浴中煮沸10min ，取出冷却后比色，其它条件和做标准曲线相同。测得的吸光度值由标准曲线查算出样品液的糖含量。 3、样品中总糖的提取、水解和测定
称取1g 梨，加蒸馏水水约3mL ，在研钵中磨成匀浆，转入三角烧瓶中，并用约12mL 蒸馏水冲洗研钵2～3次，洗出液也转入三角烧瓶中。再向三角烧瓶中加入6mol/L盐酸10mL ，搅拌均