文档介绍：第19章细胞因子的诱生和
效价测定
一、细胞因子的概念及分类
•细胞因子(cytokine)是指由体细胞(主要是免疫细胞)
分泌的能调节细胞功能的小分子多肽。
•第一类:干扰素(Interferon IFN)类:由IFNα、β
、γ三种类型组成。
•第二类:白介素类:由IL-1到IL-30,共30多种白细胞
介素
•第三类:肿瘤坏死因子类
•第四类:集落刺激因子类
•第五类:转化生长因子类
•第六类:趋化因子类
•第七类:其它细胞因子类
二、细胞因子的诱生
•1、诱生细胞:一种细胞Æ多种因子;一
种因子Æ可以由多种细胞产生
•2、诱生剂:
•除自分泌细胞外,需加入诱生剂(LPS、
PHA、ConA等丝裂原或抗原/病毒)诱导
细胞培养不同时间产生细胞因子。
•3、不同的细胞所产生的细胞因子(如表
19-1)
表19-1 不同的细胞所产生的细胞因子
T细胞 B细胞单核-巨噬细胞血管内皮细胞纤维母细胞
IL-1、2、3 IFN- TNF IL-1 IL-6
、4 α
IL-5、IL-6 IL-1 IL-1 GM-CSF GM-CSF
IL-9、IL-10 IL-2 GM-CSF G-CSF G-CSF
IL-12、14、 IL-6 M-CSF IL-6 IFN-β
16
IL-17、18 LT IFN-γ IFN-β TGF-β
IFN-r IL-12 IFN-α IL-7 IL-7
TNF TGF-β IL-8 IL-8
LT IL-8 IL-11(骨髓)
GM-CSF IL-15、18
TGF-β
三、细胞因子诱生的应用
1、生产制备细胞因子Æ制药
2、研究不同细胞的功能及生物学特征
3、可提取细胞因子的mRNAÆRT-PCRÆ
。
四、细胞因子的测定
1、测含量:常用不同细胞因子相应的McAb,
可采用ELISA、RIA测定含量用μ g/ng/ml
2、测活性:
(1)用敏感细胞或依赖细胞株的增殖法(3H-
TdR /MTT),并用标准品换称成IU/ml
• IL-1
• IL-2 CTLL、CTLL-2依赖株
• IL-3 骨髓细胞Æ集落形成法
• IL-4 CT4S依赖株
• IL-6 B9、TTD、MH60、BSF2依赖株
• IL-7 骨髓增殖,IXN/2b 依赖株。
(2)诱导效应测定法:
•① IL-12、IL-18可诱导淋巴细胞产生IFN可
通过测定IFN效价来计算同时可用标准品换
算
•② IL-8 可诱导淋巴细胞释放髓过氧