文档介绍：康乃馨植物组织培养实验报告
08级生物科学（2）班
刘姣姣
学号：200840810217
康乃馨植物组织培养
一、实验目的：
掌握植物离体快速繁育原理、方法和完整过程。
二、实验原理：
香石竹（学名：Dianthus caryophyllus）又名康乃馨,花色艳丽,开花时间长,装饰效果好,是世界上最畅销的切花之一,具有较高经济价值[1]。由于病毒病侵害,常使植株矮化,花朵变小,花色产生斑点,退色甚至不开花,影响切花产量和质量。通过茎尖分生组织培养,能够获得“无病毒”的健康植株,对于引进的少而新的脱毒种苗,再进行一次茎尖培养,进一步降低基础苗中的病毒含量,并通过组织培养的方法快速繁殖,在短期内,就可以获得大量的脱毒试管苗,使引入材料迅速在生产上推广应用,取得明显的经济效益。
三、实验仪器与材料：
仪器：超净工作台、酒精灯、电炉、烧杯、玻璃棒、镊子、解剖刀、不锈钢碟子、纱布、记号笔、标签纸
试剂：75%乙醇、%升汞、无菌水、MS培养基、 IAA 、BA 、-、蔗糖、琼脂
四、实验步骤：
培养基的配方
1、香石竹的生芽培养基
MS+ IAA () + BA( )+NAA()+蔗糖（30g/L
）+琼脂(8g/L)，-,,用小培养瓶分装10~15瓶。
另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3~4瓶，，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。
2、香石竹的继代培养基
MS+ BA( )+NAA()+蔗糖（30g/L）+琼脂(8g/L), -,,用小培养瓶分装10-15瓶。
另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3-4瓶，，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。
3、香石竹的生根培养基
MS+生根培养基为1/2MS+NAA()+蔗糖(30g/L)+琼脂(8g/L)，-,,用小培养瓶分装10-15瓶。
另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3-4瓶，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。
香石竹的生芽培养
1、无菌操作准备
将培养基、无菌水、及各种接种用具放入超净工作台，开紫外灯，照射消毒20-30min,开送风开关，关紫外灯，通风10min后，打开照明日光灯。洗手，用纱布吸取75%酒精擦手，擦拭超净台，擦拭培养基和无菌水瓶，点燃酒精灯，镊子、解剖刀、剪刀等接种工具灼烧灭菌，待冷却后使用。
2、外植体消毒
选取香石竹叶腋间生出的侧芽为外殖体,用自来水冲洗半小时,将材料上的泥土和灰尘及杂质冲洗干净,用解剖刀切取所需组织，放入培养瓶中，用75%的酒精浸泡消毒30sec,%升汞溶液浸泡10分钟,然后在超净台内用无菌水冲洗3—4次。材料消毒完成[2]。
3、外植体的制备
将消毒好的材料用无菌滤纸吸去多余的水份,然后在无菌超净工作台上，借助解剖刀剥离茎尖，。以上操作均需在酒精灯火