文档介绍：厦门大学
硕士学位论文
金鱼生长激素Ⅰ和人角质细胞生长因子异源表达的研究
姓名:盖永锋
申请学位级别:硕士
专业:细胞生物学
指导教师:陈亮
20080701
..蒯,,具有增强食欲、提高饲料转化率的作用。天然鱼含量极低,ǎ萌诤系鞍准次1泶锏哪康牡鞍祝痪ǜ玫鞍孜0闵ぜに琭怯憷嗄源固逯蟹置诘拇俳的单一亚基的蛋白激素。它参与鱼的生长代谢,能够加速蛋白质合成和脂类降分离纯化成本较高。基因工程技术为生产大量低成本的鱼生长激素创造了条件,且很多实验证明重组鱼具有天然鱼的功能,却不会对人体产生激素副作用。因此,生产基因重组鱼在养殖领域具有重要的应用价值。用引入酶切位点蚇囊铮灾柿D板,┰龌竦,编码区序列,分别定向插入原核表达载体一中,构建了原核表达载体蚿籫;;蟪Ω司鶥,在诱导下,表达出融合蛋玫鞍追肿恿看笤嘉痪势滓约翱笻抗体的涵体形式存在,尝试用连续超声破碎的方法,回收该蛋白纯度可达。ィ庖小鼠,间接ḿ觳饪固逍Ъ畚:。诱导可表达分子量约的特异蛋白T温度条件下分别产生以可溶性的和包涵体形式为主的特异蛋白,经℃诱导的茵体裂解液上清经炕竦肎4炕腉猤骨蛔⑸浣鲤,经艽砗螅笛樽榈奶逯卦龀ぢ时榷哉兆楦%,体长增长率比对照组高.%。经煅橥臣品治霰砻鳎泶锏闹刈間具有显著的促锦鲤生长作用·利用植物作为生物反应器生产具有医用价值的蛋白或者抗体是植物基因工程的一个研究热点。同大肠杆菌等微生物相比,植物作为生物反应器具有翻译后正确的修饰、加工,生产成本低的优点,构建了植物表达载体甌ü└司榈挤ㄗ;怂居俗橹6缘玫降脑生水稻通过组织化学染色、觳猓啡贤庠椿蛞丫晒Σ迦胨净蜃中。进一步通过鞫宰;蛑晗捣治觯っ鱣蚩梢宰B肌6宰金鱼生长激素腿私侵氏赴ひ蜃右煸幢泶锏难芯甮
基因植株子代进行蚏觳猓⑾謌蚰艹晒Φ囊糯ǜ哟侵氏赴ひ蜃是成纤维细胞生长因子家族的成员,皮细胞的生长和更新过程中起着重要作用,能加快膀胱、肾和肠的损伤修复和促人角膜上皮细胞生长。毕赤酵母具有分子遗传操作简单、外源蛋白高水平表达、具有近似于哺乳动物细胞翻译后的修饰与加工功能和安全性好等特点。盖兄柿,胶回收后定向插入质处理化后转化毕赤酵母,、菌落妥蹹选重组子,以及/筛选法鉴定重组菌株表型为,用分在毕赤酵母中获得表达,分子量与预期的鞍状笮∠嘟缘鞍滓∑勘泶条件进行优化,诱导关键词:金鱼生长激素;表达;纯化;水稻;角质细胞生长因子;毕赤酵母在子代中同样能够转录成功。即,最初从人胚胎肺成纤维细胞的培养上清中分离纯化获得。诒用蚇粒,构建酵母表达质粒—柿S肂盖邢咝ㄉ析表明,,重组鞍卓蟮鞍妆泶锪看锏阶罡摺金鱼生长激素腿私侵氏赴ひ颉艘煸幢泶锏难芯
.琓..一一琩甌,..,—
酾谢,.伊。甒/—肛。琣.%琣..,,—.,..瓵琲
..狿琓.—篏./,瑃籘籩籶籸金鱼生长激素腿私侵氏赴3ひ蜃右煸幢泶锏难芯—甌,瓵狿甌瓵;
缩略词一籨一狿—┧崽擒彰十六烷基三甲基溴化铵溴一宦贿胚幔畃—□0纺旱缬醇氧化酶平衡甘油复合培养基平衡甲醇复合培养基抗生素甲醇利用野生型甲醇利用缓慢型狿—金鱼生长激素腿私侵氏赴ひ蜃右煸幢泶锏难芯猤
声明人┟:妻未绘砂矿年月’弓日厦门大学学位论文原创性声明本人呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立完成的研究成果。本人在论文写作中参考其他个人或集体已经发表的研究成果,均在文中以适当方式明确标明,并符合法律规范和《厦门大学研究生学术活动规范孕》。另外,该学位论文为植物细胞与基因工程翁组的研究成果,获得翁组或实验室的资助,在生物馆笛槭彝瓿伞请在以上括号内填写课题或课题组负责人或实验室名称,未有此项声明内容的,可以不作特别声明。’
声明人┟:妻晡厦门大学学位论文著作权使用声明本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文,并向主管部门或其指定机构送交学位论文ㄖ街拾婧偷缱影,允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索,将学位论文的标题和摘要汇编出版,采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。本学位论文属于:.经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文,年日解密,解密后适用上述授权。.不保密,适用上述授权。朐谝陨舷嘤ê拍诖颉啊獭蛱钌舷嘤δ谌荨1C苎宦畚应是已经厦门