文档介绍：1所述的提取纯化方法,其特征是所述的: 1)、富集:A、在含有达托霉素的发酵液中投入大孔吸附树脂,吸附后收集树脂,装入解吸柱中; B、用含低分子醇浓度低于 50% 且含有 1-5% 盐的水溶液 pH6-7 进行解吸; C、用含低分子醇浓度高于 50% 的水溶液洗脱解吸柱,收集解吸液; D、解吸液纳滤浓缩; 2)、粗提取: A、酸性柱层析:调浓缩液 pH 至中等酸性;上柱后用 40-55% 的低分子醇浓度水溶液阶梯梯度洗脱;纳滤浓缩; B、中性柱层析:调浓缩液 pH 至中性,向浓缩液中加入 1-5% 盐;上柱后用含 30-45% 低分子醇且含 1-5% 盐的水溶液洗脱,洗脱量为树脂柱体积的 3~4 倍;用 20-30% 低分子醇水溶液洗脱,收集洗脱流分;调 pH 至中性;纳滤机浓缩; 3)、精制: A、中性柱层析:浓缩液中加入 1~5% 盐,调整浓缩液 pH 中性;上柱后用 5% 低分子醇水溶液洗脱层析柱,洗脱量为柱体积的 6-9 倍;用 10-20% 低分子醇水溶液洗脱,洗脱量为柱体积的 8-13 倍,收集洗脱流分;收集的流分调 pH 至中性;用 HPLC 法检测所收集的流分,合并达托霉素归一化含量大于等于 92% 的流分,纳滤机浓缩; B、酸性柱层析:调浓缩 pH 至中等酸性;上柱后,采用低分子醇和挥发性酸水溶液组成的混合洗脱剂进行线性梯度洗脱,洗脱量 3~6 倍柱体积时开始收集,在洗脱量达到 8~14 倍柱体积时停止洗脱;合并达托霉素归一化含量大于等于 95% 的流分; 4)、冻干: 冷冻干燥至粉末后,在 20℃~30 ℃,压力低于 10Pa 的条件下干燥 2~5 小时,得成品。 2所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征是所述的步骤 1)中的大孔吸附树脂为 HZ818 、 X-5 、 HZ804 、 HZ816 中的任一种;步骤 2)的中的层析柱填料为 PRP 512 、 C18 、或 C8 中的任一种,步骤 3)层析柱的填料选用 C18 或 C8 。 2所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征步骤 1)中是所述的解吸剂为甲醇、乙醇、丙醇或丁醇中的任一种。 4所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征是所述的解吸剂为乙醇。 2所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征是所述的盐为***化钠、乙酸铵中的任一种。 2所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征是所述的步骤 2) A中的洗脱为先以 40% 的低浓度乙醇水溶液洗脱,用量为柱体积的 2~4 倍;再换成 45± 2% 的乙醇水溶液洗脱,用量为柱体积 3~5 倍,最后用 55% 的乙醇水溶液洗脱,用量为柱体积 3~5 倍。 2所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征是所述的酸性层析中上柱液调 pH 的酸为盐酸、硫酸、磷酸、丙酸、草酸、甲酸或乙酸中的任一种或几种。 8所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征是所述的酸为磷酸或甲酸。 10. 如权利要求 2所述的达托霉素的提取纯化方法,其特征是所述的中性柱层析中上柱液调 pH 的碱为氢氧化钠、氢氧化钾中任一种。一种达托霉素的提取纯化方法技术领域[0001] 本发明属药物化学领域,具体涉及一种达托霉素的提取纯化方法。[0002] 背景技术[0003] 达托霉素是