文档介绍：中国畜牧兽医年第卷第期遗传繁育· ·
一雌二醇对鸡胚原始生殖细胞体外培养的影响
潘莹,刘艳艳,楚宁宁,宋学雄
青岛农业大学动物科技学院,青岛
摘要:为探讨雌二醇:对体外鸡胚原始生殖细胞发育的影响,采用胰酶解离法获得第期鸡胚性
腺中的,依据差速贴壁原理分离纯化,然后置于添加不同浓度、、、/的培养液中进行培养。
结果显示,/—添加组与/ 对照组相比,的发育能力无显著差异,而/和/
—:两添加组与/及/组相比,的发育能力差异显著% .。但是,/和/
:两添加组相比,的发育能力无显著差异。由此说明在体外环境中,一定浓度的—/、/可促进
鸡原始生殖细胞的发育。
关键词:鸡胚胎;原始生殖细胞;体外培养;一雌二醇
中图分类号:. 文献标识码: 文章编号:—
原始生殖细胞, 的很多缺点。一雌二醇是生物活性较强的雌激
是生殖干细胞,其分离培养及保存对体外生殖干细素,以往大量研究结果证明,雌激素可以发挥与生殖
胞的建立、遗传资源的保存、濒临灭绝动物的拯救及和非生殖有关的生理作用。本试验以鸡胚胎为材
体外诱导组织器官的建立等都具有重要的意义。对料,尝试酶解法分离获得,在不使用饲养层的
于禽类的体外操作主要集中在转基因鸡的研情况下进行体外培养,研究一雌二醇对体
究等,、同种间嵌合体、异种间嵌合体外发育的影响,可为转基因禽类的研究和应用提供
的制备等,;李赞东等,及通过体外参考依据。
培养获取干细胞等,;安静, 材料和方法
等几个方面,禽类嵌合体已获得了很高的后. 鸡胚新鲜寿光鸡种蛋由寿光慈轮种鸡场提
代遗传率等,,对于鸡胚的长期培供,在.℃, ~ 湿度条件下孵化至.
养及建系等方面的研究报道较少。秦洁等以第期,孵化分期按等和李
鸡早期胚胎为材料,尝试分离、培养,所获得碧春等建立的方法划分。
的代鸡胚不但有效的维持了的未分. 培养液的制备基础培养液:培养
化状态和正常二倍体核型,也具有作为多能性胚胎基,添加体积分数胎牛血清—
干细胞的一系列特征。谢蓓等从~期、/丙酮酸钠、./一巯基乙醇、
鸡胚血液提取,当采用细胞因子和鸡胚胎/青霉素和/链霉素。本试验采
性腺基质细胞共培养时能存活代且每代细胞增用组培养液对原始生殖细胞进行体外培养,各组
殖可达近倍。尽管鸡胚胎的分离培养已培养液分别添加、、、/终浓度一雌
取得一些成果,但的体外培养需采用饲养层, 二醇。
同时培养液中添加各种生长因子,仍没有摸索到最. 鸡胚的分离、纯化和培养酒精消
适合的传代培养条件,,用
。体外培养模式大多采用饲养层细胞无钙、镁的清洗次,解剖镜下用玻璃针去除
作为支持物,不使用饲养层而使用条件培养基培养头、尾及心肝凸,将性腺和中肾一起剥离,进而分离
细胞是一种趋势,它可免除使用饲养层细胞性腺。将获得的性腺用清洗后剪碎,在室温下
用. 胰蛋白酶.%消化
收稿日期:——
~ ,并用移液器轻轻吹打使组织块分散,以
作者简介:潘莹一,男,山东人,硕士生,研究方向:动物生
消化液用量的终止消化。离心
殖发育。
通信作者:宋学雄一,男,教授,研究方向:动物遗传育种,弃上清,用培养液重新悬浮细胞,进行台盼蓝
与繁殖学。—: .. 染色计算活细胞数,用基础