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犬瘟热病毒分离、鉴定及其抗原蛋白研究.pdf

上传人:hytkxy 2014/7/11 文件大小:0 KB

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犬瘟热病毒分离、鉴定及其抗原蛋白研究.pdf

文档介绍

文档介绍:硕士学位论文四川农业大学犬瘟热病毒的分离、鉴定及其抗原蛋白的研究李惠敏年分类号;』骸臁:学号:
摘要本研究对来自临床疑似犬瘟热的三色人痫料和狲的核苷酸片段,与理论值一致。该检测方法特异性、敏感性高,可丌贑床快速取三色犬和狮子狗病料的肝脏组织制成组织恩液,接种细胞侵蘼毯锷鱿胞系掷氲株犬瘟热病毒,命名为旰蛃株。瓴《疽材茉贒赴犬肾臀植《九嘌讨衟值的稳定,都足成功分离和培养犬瘟热病毒的天键因素。旰蚐株在细胞上的细胞病变飨裕韵赴母腥径玖Ψ直鹞提取辍株和寥妊AC的病毒蛋白,经和免疫印迹分析发现,旰蚐株蛋白条带相似,与暧条,牡鞍滋醮肿量的蛋白条带均能与犬瘟热阳性血清反应,呈现踅仙畹淖厣醮胍跣匝清均无反应。。关键词:犬瘟热犬瘟热病毒分离鉴定凡×,结果为阳性。从反转录产物中扩增出大小约为腇基因检测。细胞吓嘌鲋场T诓《镜姆掷肱嘌鴔·,消除小牛即さ亩扰凼祟昔砗蟮奈持液不加小牛血清黾硬《Ⅱ为.、..
⋯⋯旃究生签名:/§当研究生签名:/《‘如嘭‘成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谓牡胤酵猓宦畚膖陌渌孑本人郑重声明:所呈交的学位论文足我个人在导师指进仃研究作所墩搿的人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也刁;包含为获得到川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我~竟ぷ鞯挠弥玖行⊙芯克龅娜蝔蚬毕拙在论文中作了明确的说明并表示了谢意。弓本人完全了解四川农业搜в泄乇A簟⒓看ㄑ宦畚牡墓娑ǎ貉S腥ㄏ窳簦瑊向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允订:论文被卉泻徒枥ǎ琲圆蒍坝⑺跤』蛏等复制手段保存、汇编学位论文。同意网川农』胙В以川同力式在一:同媒体悍⑴⒋ú逖位论文的全部或部分内容。导师签名篔
≡餍胁⊙虬感染引起的急性、高度接触性传染病,足当憾晕夜怠⒚ざ镅骋岛鸵吧动物保护业危害最大的疫病之一,经常引起大批犬、貂、狐等动物发病,病死率%%,雪貂高达¨¨。培养的方法培养出了T谖夜甏疜,华凼『『等群蟠咏诘腃弱毒疫苗株中分离出多种疫苗株。现已查明犬瘟热病毒属于副粘病毒科麻疹病毒属海豹瘟热病毒⒑k辔寥炔《、鼠海豚瘟热病毒凰隡溆忻芮械目乖叵岛凸餐匦浴⒂隡超微形态和结构完全一样,而且与新城疫及其他副粘病毒非常相似薄里圆形或不规则形,有时呈长丝状,直径不等,大小差异较大。基因组为负链线性《荆蜃槌ぴ暮艘驴怯苫蜃橛氲鞍譔组成,呈螺旋状盘曲在病W拥膢央,外面覆有一近似双层轮廓的脂质囊膜,膜上密布卡聪送唬送恢缓D兀奚窬氨酸忙Sτ玫タ寺】固逖芯糠⑾郑煌丛吹腃毒株虽然在细胞蚀斑、鸡胚痘斑形成方面、对乳鼠的神经毒力方面有明显不同,但在结构蛋白和核酸电泳图谱方面却相差甚微,故仍属于同一个血清型酚皂等杀死。婵纱婊钍埽椅率欤Ⅱ町使病毒火活。.韵和以上的酸碱环境也可使其迅速灭活。但在低温冻结时可保存几个月,Ⅴ酢⒑铩⒓腿说亩喔梢叮痛ù赴仙ぃǔ醮闻养比较困难。实验感染也可使鸱胚、雪貂、乳鼠、人发病,ǎ踝钗R赘校在自然条件下,筛腥救灰延醒芯糠⑾郑寥炔《净箍筛腥救频钠它动物如狐、狼,鼬科、浣熊科、猫科缡ā⒒ⅰ⒈等多种动物。近年来其感染犬瘟热是寥炔《,早在年,吞岢霰静〉膤阋恢植$瘛闐莳次织列为该属的病毒还有麻疹病毒、牛瘟病毒⑿》篡皇尬烈匀取⒏稍铩⒆贤庀吆陀谢芗撩舾校妆籉狻⑷骶ā⒁颐选⒓兹┯朊公认的笛槎铩‘
的范围不断扩大,已经延仲至西湍、夺猕视人’。然勾又襊病的病人组织中检测出怂醠。近来试验农明,筛腥救斯卑┫赴担在培养的、等灵长类细胞系中也可增炳,并表达~种跨膜蛋白珻使细胞对病毒易感,被认为南赴芴錓病U馐沟肅可能成为由动物感染于肝、脾、肿、肾、脑和淋巴结等多种器官与组织中,通过眼泪、舁涕、唾液、尿液和呼出的空气向外排出病毒。病毒在带毒犬体中的持续时间很长,甚至可以感染下一代的幼犬。本病的传播可能通过直接接触,或近距离的飞沫传播,因此在同一所建筑物里的动物大多受到感染。侵入途径为扁桃体以及其他的淋巴组织、呼吸道上皮和Ⅱ硅结膜。雪貂经鼻接种后小时,应用荧光抗体技术可在颈部淋巴结内检出特异性病毒抗原。病毒首先在内皮细胞的胞浆内出现,呈现细小的荧光颗车讧,但在感染后期,这些颗粒凝集成大的卵圆形结构,类似胞浆内包涵体。于实验感染后第欤勺匝液、纵隔和肠系膜淋巴结、脾脏中检出病毒。病毒在这些部位常可持续欤经熳笥遥渎《镜牡ズ讼赴茉谌砀鞑课徽业健T诓荒懿行Э固宓娜中,感染继续发展,广泛侵入上皮细胞。这些上皮细胞遭到损伤的纪采,舾曾农现特异性临床症状,如食欲不振、腹泻、结膜炎和痉挛等。将编,辑鱼接注入冢锊感染,而且继续保持对犬瘟热的高度敏感。康复犬可歌得终生免疫力薄犬感染具有明显的年龄、品种和季节性,而且似有炅