文档介绍：中南林学院
博士学位论文
竹叶生物活性成分提取分离及其抗菌活性研究
姓名:陆志科
申请学位级别:博士
专业:森林培育学
指导教师:谢碧霞
20041001
中文摘要竹子是禾本科裱强多年生常绿植物,广泛分布于亚洲、拉丁美洲、非洲。世界竹类植物有~属多种,其中中国有属嘀帧V褚吨泻卸嘀只仆@嗷衔铩⑾愣顾啬邗ァ⒒钚远嗵等丰富的生物活性成分,具有重要的生理功能和较高的保健价值,开发潜力巨大。本试验以竹叶为原料,系统地研究了竹叶的抗菌防腐性能。以蒸馏水、乙醇、乙醚和石油醚作溶剂,研究了干燥方法、溶剂等因素对提取率及提取液抗菌活性的影响,通过单因素试验和正交试验考察了温度、液料比及时间对提取率的影响,确定了合适的浸提条件,并对竹叶不同竹种、不同生长期的抗菌活性进行了比较。以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌及部分霉菌和酵母菌为对象菌,用滤纸片法和平板稀释法进一步证实并系统地研究了竹叶的抗菌活性:以革兰氏阳性菌中的金黄色葡萄球菌及革兰氏阴性菌中的大肠杆菌为代表菌种,首先对竹叶提取物分组分、分溶剂萃取段进行抗菌活性的初步研究,筛选出对所选细菌的生长具有明显抑制作用的抗菌活性部分:乙醇溶解物经石油醚、乙醚萃取后对两种细菌的抑菌活性最强。对其进一步精制,通过抗菌活性追踪,采用硅胶和聚酰胺柱层析、真空层析等方法,从中分离并纯化出志哂锌咕钚缘某煞郑、等波谱技术,结合~定的化学方法以及有关文献数据对照,并分别进行初步鉴定。将纯化得到的捌蕊性化合物与几种具类似结构的化合物进行抑菌效果比较,初步确立了黄酮类优合物结构与抗菌活性的关系。分离纯化得到的化合物与金属离子形成的配合物,提高了抑菌效果。并将竹叶防腐抑菌荆应用于卤肉、水豆腐和番茄片的保藏。研究结果表明:的提取率及抑菌效果有显著影响为羯购笠跚Т沃ィ椅铝栏山系停!.%,太阳晒干燥最低,为ィ嫒确绺稍镆菌力最强,对大肠杆菌的抑菌圈直径最大,为.,太阳晒后阴干次之,为.,室温晾干较弱,为.,太阳晒干燥最弱,为.。袅笏鸵掖妓芤毫街痔崛∫憾运韵妇⒚咕徒湍妇幸志用。%乙醇提取液对细菌的抑制效果最好,抑菌圈直径达到,:陨希酵母菌的抑制效果次之,对霉菌的抑制效果最弱:蒸馏水提取液对所试微生物的抑制顺序同乙醇提取液,但对细菌、酵母菌和霉菌的抑制效果稍差于乙醇提取液。毫媳群臀露榷蕴崛÷实挠跋旖洗蟆R掖嘉H芗潦钡淖罴烟崛」ひ仗跫为:液料比:⒚惶徜谭妗⑹÷饰.%。.中南林学院博Q宦畚模褐裰萆锘钚猿煞痔崛》掷爰癑咕钚匝芯
提取;活性成分:分离纯化;抗菌活性煌裰旨安煌て谥褚兜目咕钚圆煌B橹褚兜目咕钚郧坑谄渌竹叶,潞轮醒烧5闹褚兜囊掖继崛∫旱目咕钚越虾谩褚兜囊志坠悖韵妇⒚咕徒湍妇幸志浴R掖继崛∫憾韵菌的最低抑菌浓度为%,对霉菌和酵母菌的最低抑菌浓度为%;袷碧崛∥锟咕钚詐“范围宽,在为的基质中,表现出较强的抗菌活性。褚短崛∫℃加热咕钚圆皇苡跋欤℃加热,抗菌活性减弱。褚兑掖继崛∫悍直鹩%以上的维生素忻飨孕志饔谩捎霉杞汉途埘0分阄觥⒄婵詹阄龅确椒ǎ又蟹掷氩⒋炕种具有抗菌活性的成分,用、等波谱技术,结合一定的化学方法以及有关文献数据对照,分别鉴定为:黄酮营元类仆\绽,查耳酮类仆4碱类F渲校槎@在竹叶中发现并分离得到为首次报道。它们对革兰氏阳性菌、阴性菌均具有不同程度的抑制作用。抑茵结果显示:。将纯化得到的抗菌性化合物、与几种具类似结构的化舍物进行抑菌效果比较,初步确立了黄酮类化合物结构与抗菌活性的关系。结果表明:查耳酮类的抑菌效果最佳志Ч翰槎@黄酮醇苷类仆]元类仆\绽。利用分子连接性指数法计算四种单体的定量构效关系,初步研究了四种单体结构与生物活性的关系,并以数值的形式反映了分子的加和性和构成性的结构信息。通过计算不同阶的连接性指数,来区别它们生物活性随结构变化的程度。.对分离纯化得到的化合物与金属离子形成配合物,提高了抑菌效果。用正交试验筛选出最优配方,结果以:簂进行组合,得到具有防腐保健型抑菌剂。.添加サ闹褚斗栏志恋铰比庵械姆栏Ч.%山梨酸钾溶液浸处理的相似;添加到水豆腐、番茄片中的防腐效果与添加山梨酸钾的效果无差别;与不添加防腐剂的对照相比,均能明显延长保质期。关键词:竹叶;南林学院蹲宦垡澹翰簘生物活性成分提取分离及』骨睢毖芯ァ
凼引言竹子植物是禾本科的一个自然类群,广泛分布予￡洲、拉丁美洲、非洲等受季风气候影响和水热条件较好的热带、亚热带地区,少数属种生长在温带乃至亚寒带地区。世界竹类植物有属多种,其中我国有属余种“H澜缰褡右鸭窃氐挠嘀郑惴悍植加诙涎恰⒂《取⒅国南部、南美和日本等地。我国是竹子中心产区之一,主要分布在广东、广西、福建、浙江、湖南、江西、四川、江苏、贵州和云南等省”兰腿蛑窳置积约万忌置婊%左右:预计世纪全球竹林面积增加倍,可达~万际澜缟置婊%~ァF渲校貉侵尢窖蟮区;万幻