文档介绍：【资源】转贴---特染：结缔组织染色
wanliheng 丁香园版主
.438
积分473
得票545
-04-19 11:38消息引用收藏分享
分享到哪里？复制网址新浪微博豆瓣社区腾讯微博开心网人人网
只看楼主第一节结缔组织多色染色法
一、Mallory三色染色法
.试剂配制
(1)重铭酸钾液 ,醋酸5ml,蒸储水95ml
⑵ 苯***蓝桔黄 G液苯***,桔黄G2g,磷鸨酸1g,蒸储水100ml
(3)酸性复红液 ,蒸储水100ml
.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)重铭酸钾液10min。
(3)蒸储水冲洗 2min,蒸储水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸储稍洗。
(5)苯***蓝液20min, 95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
.结果
胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。
.注意事项
(1)酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯***蓝液染色后，用 95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。
(4)另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。
二、Masson三色染色法
.试剂配制
Masson复合染色液酸性复红1g,丽春红2g,桔黄G2g, %醋酸300ml。
(2)亮绿染色液 , %醋酸100ml。
.染色步骤
中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
Masson复合染色液 5min。
%醋酸水溶液稍洗。
5%磷鸨酸 5-10min。
%醋酸水溶液浸洗2次。
(5)亮绿染色液5min, %醋酸水洗2次。
(6)无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
.结果
胶原纤维呈绿色，肌纤维呈红色，红细胞呈桔红色。
.注意事项
Masson复合染色液，经磷鸨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。
(2)亮绿染料可用苯***蓝替换，可用来作为对比观察染色的效果。
三、显示胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的三联染色法( 1993年)
.试剂配制
(1)高镒酸钾硫酸液 %高镒酸钾水溶液中加入 5ml的硫酸。
(2)维多利亚蓝染色液维多利亚蓝2g,,间苯二酚4g,蒸储水200ml。将上述物质混合后加热煮沸，边煮边搅拌，约5min。然后用另一容器取 30%三***化铁水溶液 25ml, 另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中继续煮沸 3min,不断搅拌溶液呈胶体状。去火冷却
过滤，将滤纸上的残渣连同滤纸放在 60c恒温箱中烤干。残渣呈深蓝色细颗粒状粉末，再
溶于400ml的70%乙醇液中。然后加浓盐酸 4ml和苯酚5g放置至成熟后使用。
(3)丽春红染色 %丽春红S水溶液15ml,苦味酸饱和水溶液 85ml。
Gomori氨性银改良液取5%***银水溶液5ml,滴加浓氨水由棕黑色变清为止，再加入3%氢氧化钠水溶液 5ml,此时该液突变紫黑色，这时再加入氨水使之变清晰为止。最后用蒸储水补足至50ml,盛棕色试剂瓶中，置于冰箱中备用较长时间。
.染色步骤
(1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
(2)高镒酸钾硫酸液氧化 3min后，自来水浸洗后，用 2%草酸漂白2min。
3) 5%硫酸铁镂1min。
4) Gomori氨性银改良液染 1min。
(5)蒸储水洗2次，用15%甲醛液还原1min。
(6)蒸储水洗2次，%***化金30s,蒸储水洗1次。
70%乙醇浸一次，再浸入维多利亚蓝液中染 30min-1h。
95%乙醇分化1min左右。
(9)浸入蒸储水中1min后，用丽春红S染色液染色2min。
(10)直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
.结果
胶原纤维呈红色，网状纤维呈黑色，弹力纤维呈绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色。
.注意事项
氨性银液滴染时，要用干净吸管，防止银液污染而发生沉淀。氨性银液作用后的切片不能倾倒，应将蒸储水冲洗切片上的银液，这样就不会使银液表面挥发的银颗粒而沉积在组织上。第二节胶原纤维
一、胶原纤维的分布和组成成分
胶原纤维是结缔组织中的三种纤维之一，分布最为广泛，含量最多。主要分布于真皮、键、韧带、骨、透明软骨、动脉、肠壁、子宫和基底膜等，胶麻纤维具有韧性大，抗拉力强的特点。在弱酸或沸水中可慢慢溶化成胶水，称白明胶。胶原纤维和网状纤维的基本构造相似，都以胶原单位(