文档介绍：黑龙江八一农垦大学
硕士学位论文
农杆菌介导水稻转ICE1基因的研究
姓名:向殿军
申请学位级别:硕士
专业:作物遗传育种
指导教师:殷奎德
20070401
摘要霉素较高的抗性,经卡方屎闲约煅楸砻鳎个代株系自交形成的种子表现出分拟南芥基因是重要冷诱导调节基因。基因在低温下被激活,刺激疍它蛋白聚合酶等嗷プ饔茫骺叵掠我幌盗欣溆盏蓟和在植物寒冷适应中起作用的其它基因的表达,提高植物抗寒性。目前,水稻中已发现一些与拟南芥疍吹腛骺鼗蚣耙恍├溆栈绻ɡ溆盏蓟騃在水稻体内强烈表达或诱导表达,就有可能培养出耐寒的水稻品种,我们利用实验室已经克隆的基因,,希望获得耐寒的水稻品种。,经觳株呈阳性,植株没有矮化现象发生。部分粜缘淖植株代经杂交检测呈阳性。对杂交呈阳性的代植株自交的种子进行潮霉素抗性测定,测定结果表明,与未转基因水稻相比,代表现出对潮色体上。抗寒能力检测结果表明,—株系的剐院蟠剐院蟠镀懈彼岷吭龇飨愿哂谖醋;蚨哉铡I鲜鼋峁砻鳎狪咎岣关键词:冷诱导基因,基因,水稻愈伤组织,农杆菌,转化频率因表达,疍B家蜃釉俳岷显贑基因启动子的疍<希肫,建立了星鉴稻号成熟胚愈伤组织再生体系,利用根癌农杆株晕阳性,个别植株有矮化现象笈生;得到拟转的潮霉素抗性植株株,离方式,占%,表明外源基因在转基因植株的染色体上是单拷贝插入的;有鯰晗底交形成的种子没有表现出分离方式,可能是外源基因以多拷贝、多位点的方式插入水稻染株死亡率明显低于未转基因对照。脯氨酸含量测定结果表明,低温处理后一和晗档了抗寒能力。
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∞略词表乙酰丁香酮邪被堰碱基对花椰菜花叶病毒头孢噻肟钠冷诱导基因硫酸铜二甲基亚砜四种脱氧核苷三磷酸溴化乙锭乙二胺四乙酸千对碱基培养基十二烷基硫酸钠致瘤质粒三羟甲基氨基甲烷毒性区黜猄瘢畒西缺窖跻宜牛血清白蛋白潮霉素磷酸转移酶潮霉素卡那霉素激动素细菌培养基摩尔每升甘露醇奈乙酸聚合酶链式反应利福平转每分种链霉素宜幔疎撼逡酆厦转移撼逡嘌啊戤甀疞“阨靶ノ灬襺廿阛痬/瓻Ⅱ‘
镀奄幽研究生签名:向撤锋研究生签名:鲆笊独创性声明关于论文使用授权的说明扩卯年拢萑猐年‘月哆日时间:州田年翴;日C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得黑龙江八一农垦大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解黑龙江八一农垦大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意黑龙江八一农垦大学可以用不同方式在不同刊物上发表,传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:时间:,
芯磕康暮鸵庖第一章引言水稻是人类主要粮食作物之一,世界上有三分之一以上的人以稻米为主食。中国人口众多,是大米生产和消费的大国,水稻在国民经济中占有非常重要的地位。然而随着国民经济的发展和社会环境的改变,水稻生产受到越来越多不利环境因素的限制,特别是低温寒害。严重制约了水稻的高产和稳产,极大限制水稻的区域性分布。低温伤害是全世界农林生产中损失巨大的一种严重自然灾害,己引起各国政府的普:;刈ⅰE嘤哂心秃芰Φ闹参锸桥┮瞪系囊桓鲋匾?翁猓然而植物的胁追耐性大多属于多基冈控制的数量性状,现有可利用的抗冻种质资源缺乏,采用常规育种技术改良植物的胁追耐性、耗时费力、困难大,难以达到定向改良目的。通过基因工程手段已克隆到来自拟南芥等有机体的编码生化代谢关键酶和逆境胁迫信号传导的一些重要基因,采用重组妥;蚣际跸蛟耘嘀参锏既肟苟惩庠茨康幕蛭E嘤购魑锾峁┝艘惶跽感碌途径。近年来已经克隆了一系列与生物抗寒有关的基因,将这些基因转人植物中,获得一些抗寒力较高的转基因植物。我国是世界上最大的发展中国家,面僮啪薮蟮娜薈沽Γ耆丝诖锏搅亿,预计到年将达到亿左右,年将达到亿左右。人口的增长必然带动粮食需求的增长,根据有关方面的测算,预计到年需求量为亿吨,年为诙忠陨稀5俏夜地面积不断减少,,,年减少了谀丁D壳埃全国人均耕地仅为叮J澜缙骄降,妇的省区市人均耕地不足叮胧阑喂认的警戒线亩已经很近。今后耕地面积仍然会继续减少,但粮食需求会不断增加,为确保粮为我国粮食安全做出了巨大贡献。由于黑龙江省地处北纬,是