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根癌农杆菌介导反义LEAFY基因导入悬铃木遗传转化研究.pdf

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根癌农杆菌介导反义LEAFY基因导入悬铃木遗传转化研究.pdf

文档介绍

文档介绍:硕士学位论文河南农业大学O臁籰郑州握疸壅盘菌金昱的厘竖蘩軪﹃
导搏签名:徽日期泌名月/研究生签磊帧菡敉5际η┲莍堵茈ρг毫斓甲好硗究生签名:,董日姚骆乱蝗日辫甓嘣滦洼;镙密擎麟文程舞密瑟逶藩予零芰捌蕊。根癌农杆菌介姆的反义覨虻河南农业大学学位论文独戗眭声明、使用授权及知识产权虹屠承诺书学位论文使用授权及知识产权归属承诺学位论文题耳入悬铃本的遗传转化研究硕士导师赵振利森林培育如需保密,解密时间颦日势!辍拢と本人完全了解河南农娥大学关乎保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学校要求提交学经论文豹霹剧本窝电予舨本;学校有权保存提交论文豹印刷本和电予版本,并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复锲手段保存、汇缝学位论文。本人霹悫澎凑农业文学可以熙不嗣方式在不冠媒体上发袭、传播学位论文的全部成部分内容。本人完全了解《舅毒农烂大学知识产投傈护办法》鼢蠢关裁定,在毕效离开河南农业大学后,就在校期间从譬的科研工作发袭的所有论文,第一署名单蕴必湾嘉农业大学,试验耪辩,原始数据、孛援豹专穰等熟识产权均杜业大学所有,否则,承担相应的法律责任。年月学位级裂学生学科姓名范国强专业月日,冢学位论文是否保密否.
致谢本论文是在导师范国强教授悉心指导下完成的。从论文的选题、实验设计到论文的最后完成,都倾注了导师的大量心血。导师求实严谨的科学精神、勤奋认真地工作态度、精深博学的学识修养,引导我初探科学之曲径,培养我建立求真求实的态度,使我终身受益。三年来,导师在我学业上严格要求,生活上给予无微不至的关怀和照顾。值此论文完成之际,我谨向导师致以最诚挚的谢意。衷心感谢蒋建平、刘震、茹广欣、冯建灿、黎明、董慧英等诸位老师三年来对我的教诲。衷心感谢中心实验室的黄晓书、张慧琴,谢慧玲和周青云等诸位老师,在他们的热情帮助和指导下本实验才得以顺利完成。感谢崔红老师在实验过衷心感谢在实验、学习和生活中给予我很多帮助的翟晓巧副研究员、张胜、曹艳春、史俊华,学弟胡文元、曾辉、祝宝玉、靳飞、刘国志、贾峰,学妹张变衷心感谢我在本科、研究生期间林学园艺学院的老师和各位同学。衷心感谢我的家人和朋友,他们的关心、支持、理解、鼓励、爱护和帮助是年掠谥V程中给予的指导。感谢研究生处老师们对我的帮助和教导。莉、魏真真。我战胜一切困难的精神支柱。最后,再次深深地感谢所有关心、支持和帮助我的领导、老师、同学和朋友们赵振利.
摘要反义先肓诵迥净宰橹小1臼匝榛竦昧艘慌;蛐迥局仓辏馕:笃谠谏本试验研究了影响根癌农杆菌转化悬铃木的多种因素,优化了转化条件,建立了悬铃木··腃组织和幼芽诱导率为腒楹系闹柿颗ǘ任·。中,以℃、光照强度为关键词:悬铃木;根癌农杆菌;反义颍灰糯;根癌农杆菌介导的反义虻肌迥镜囊糯;芯悬铃木树干高大,绿化效果好,叶片吸尘、杀菌,抗有毒气体和病虫害能力强,是世界著名的行道树,有“行道树之王”的美誉,因此,我国许多城市都有种植。但其果毛不仅污染环境,而且会引发呼吸系统及皮肤疾病,给居民的生活带来了极大的不便。为此,国内外学者曾进行了大量的研究工作,以期解决果毛污染问题。随着科学技术的发展,;筛选出了适宜悬铃木组培苗叶片奶崛》椒ǎ豪肎报告基因和技术检测了外源基因在转化植株中的表达,为遗传转化结果提供了分子生物学证据。实验结果如下:票噶俗;迥镜墓こ膛└司1泶镌靥錺姓狭朔匆錖基因,在反义蛏嫌幸籋酶切位点。通过碱裂解法提取质粒肏和对其进行酶切,切出了预期大小的巍=ù酥柿S枚橙诜ǖ既敫┡└司鶯。┰鱿允痉匆錖基因转入农杆菌中。甂虲等抗生素对悬铃木外植体再生的影响存在一定的差异。在幼芽生根和叶片分化培养基中分别加入质量浓度为·,根和叶片愈伤组织、幼芽的诱导率均为辉诜只蜕嘌蟹直鸺尤胫柿颗ǘ任·和则可使愈伤组织、幼芽和根的诱导率为T谝镀只嘌型奔尤胝种抗生素,愈伤呕烁┡└司榈夹迥镜囊糯;逑怠Tづ嘌男迥疽镀贠值为的根癌农杆菌菌液中浸染后,再在含有·的乙酰丁香酮的共培养培养基上黑暗条件下共培养镀囊糯;首罡摺8锰逑档慕⑽=信└司榈纪庠目的基因培养悬铃木新品种奠定了基础。秆〕隽诵迥疽糯;讨幸种朴俗橹只奈镏始捌渲柿颗ǘ取T贒、和治镏手幸.·,褐化率为%;质量浓度为·的只首罡呶ァF渌蛩条件下褐化率达%,效果最理想。秆〕隽诵迥咀榕嗝缫镀崛的方法。在.、.虲Ⅱ提取叶片种方法中,.法为崛〉淖罴逊椒āü欢ㄅǘ菿难≡衽嘌孕迨跬庵蔡褰性偕嘌秆。蕴糠植痪备抗性的白化外植体。对筛选出的再生植株通过组织化学染色法检测钚裕峁转基因植株的组织中检测到蓝色。匾炖┰龅姆肿由镅Ъ觳饨峁脖砻魍庠茨康幕产水平上选育出无球果的转基冈悬铃木

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