文档介绍：江南大学
硕士学位论文
黑根霉催化甾体C<,11>α-羟基化反应的研究
姓名:杜大庆
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:张星元
20060601
摘要甾体类药物是医药行业中产量仅次于抗生素的第二大类药物。淄体激素药物生产中,甾体母核的多个基团需要进行修饰,甾体微生物霍腔从κ侵匾5溺尢遄化反应之一。本文对黑根霉的腔从辛搜芯浚范唆腔从ψ罴延Q条件和工艺条件,探讨了碳源和转化期条件对黑根霉的霍腔;痰挠响,为解决羟基化转化过程中溶氧不足的问题讨论了补水工艺。论文通过实验确定了羟基化反应的工艺条件:最佳培养基配比榉帧蜭F咸糖,玉米浆,硫酸铵,蚕蛹粉蝗芰吓浔任N质衔换费趸铺逋:乙醇:水::;菌体培养淮瓮读稀发酵培养基中按蜭添加二甲基亚砜转化结果较好,摇瓶转化率达发酵培养基中按蜭添加,∥砑覶,,采用混合碳源葡萄糖:糊精为航饬似咸烟且种谱饔茫⒔凸奘匝樽;式隙哉仗岣吡%。发酵罐实验结果,投料时调值至,转化期维持在甇一甇,转化率比对照提高黑根霉对甾体的!.羟基化转化过程中存在溶氧不足的问题,经实验确定了补水调工艺。自动发酵罐装液嘌时补水⒌,;时仍ひ仗岣吡%。关键词:黑根霉,甾体,霍腔%。了ァ中文摘要
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签名:五年誓爱日期:删年∥:少彩年∥月夕日独剖性声明关于论文使用授权的说明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规定:江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复铡手段保存、汇编学位论文,并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。签名:
第一章绪论课题意义甾体的蛞霍腔从踚、绿僵菌、祷拯霉曙甾体类药物具有抗炎、避孕、利尿、抗毒、抗过敏、抗休克作用,广泛用于湿疹、哮喘、风湿疾病。近年来,甾体药物在医疗领域的应用范围不断扩大,广泛应用于治疗风湿、心血管病、胶原性病症、淋巴白血病、人体器官移植、抗肿瘤、细菌性脑炎、皮肤病、内分泌失调、老年性疾病等,甾体类药物还对某些癌症,尤其是激素依赖性肿瘤具有一定的疗效g尢謇嘁┪镒饔梅段Ч恪⒉扛撸且揭┬幸抵薪龃斡诳股氐牡二大类药物【。甾体激素药物生产中,甾体母核的多个基团需要进行修饰,霍腔从κ侵要的甾体转化反应之一。甾体的霍腔杂阽尢逡┪锏暮铣杉敖峁垢脑炀哂兄匾意义,通过羟基化反应可以引入高生理活性基团,从而大大增加疗效,减少副作用,并能改变作用的专属性g尢宓腃腔从τ删哂戌尢錭,。腔芰的微生物完成。目前,用于甾体腔从Φ奈⑸镏饕S泻诟葡枝根霉艇Ⅺ⒒祁吕锳青霉、诺卡氏菌等。文献报道了一些具有较高腔从钚缘奈⑸铮埂绿僵菌是近年国内研究较多的甾体一羟基化微生物。但是赭曲霉在转化后期产生与产物难以分离的砖红色色素,绿僵菌也存在活性不稳定、转化不专一的缺点,限制了其工业化应用。工业生产上,国内普遍使用黑根霉进行腔从Γ窍钟泄ひ转化率不高,对其进行研究,可以改进现有工艺,提高转化率,因而具有生产指导意义。许多微生物具有甾体霍腔从δ芰Γ悄芄徊尢弭腔福尢弭腔酶是一种胞内酶,需要脱醯牟斡耄ü齆递氢,氧化甾体底物完成羟化反应。上图是沃氏物换费趸铺逋】霍腔从獭笛】
国内外研究现状和进展趇台湾的扩妊芯苛唆髑构潭ɑ赴曰铺逋5腸世纪年代,德国化学家等成功的用肾上腺组织匀浆使脱氧皮质酮转化腔铺逋#∪チ嘶Ш铣傻龉ば颍易;矢摺成,证明其为诱导酶;反应机理上,用等实验证明羟基上的氧来自空气而不是%则使甾体药物研究经历了世纪一年代的高峰时期,一年代进入低谷。但是近阍等年报道了将黑根霉孢子用聚丙烯酰胺、琼脂、。张丽青等㈦选用泡敌将底物制成混选液,用胶体磨将底物磨成目帕M读希应的研究。世纪中期甾体类药物被发现以来,人们就认识到微生物转化对甾体药物生产的重要性。成可的松。在此启发下,年美国普强药厂的和【状斡煤根霉将黄体酮一步转化成专一性强,解决了皮质激素合成中在胙踉拥墓丶侍猓佣1倭绥尢錭.。霍腔峦揪丁等在