文档介绍：一、目的要求
徒手切片法是观察植物内部结构的简易制片法。所需的仪器用具简单，
药品经济，操作方便，费时较短，且易于保持材料的天然色泽和活体
结构，必要时，也可经过脱水、染色制成永久制片而保存。但是徒手
制片对于体积过小，质地太软或太硬的材料，则难于处理，同时，也
不能制成连续切片，这些均为不足之处。
二、材料、用品
1、用品
显微镜、剃头刀（或刀片）、毛笔、镊子、培养皿、染色皿（或小酒
杯）、吸管、载玻片、盖玻片、吸水纸。 1% 番红水溶液（或 50% 酒
精溶液）， % 固绿 95%酒精溶液， 70% 、 85% 、 95%酒精，纯酒精、
二甲苯和中性树胶或加拿大树胶等。
三、方法与步骤
、选材
所用材料不宜太软或太硬。一般植物幼嫩的根茎或一些植物的叶片、
叶柄等均可使用此法。质地较薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成
宽约5〜6毫米，长1〜，夹在夹持物（如胡萝卜根或
马铃薯块茎等 )中进行切片。使用夹持物时，先将夹持物的中央切成
两半，然后将切好的材料夹入，合拢夹持物进行切片，也可将叶片卷
成筒状再切。
2、切片
( 1 )盛清洁的水于培养皿中。然后用左手的拇指及食指、中指夹住
材料，拇指的位置要低于食指，并使材料的上端伸出指外2〜3毫米，
材料的切面必须保持水平方向。
2) 右手执刀 (剃头刀或刀片 ) ，平放在左手食指之上，刀口向内，
自左前方向右后方滑行切割，要用臂力，不要用腕力，不可向内平切。
(3)拉切的速度宜快，一次切下，不要中途停顿或似拉锯式，以免损
伤材料或切得不平。
切片过程中，如发现由于用力不均而使材料表面倾斜时，必须立
即削平。
刀片或剃刀必须锋利，材料及切片均需经常沾水，以保持材料湿
润、润滑。
(6)切下的薄片可随时涮入培养皿的水中，以备观察 ;等切到相当数量
后 ;再选择其中最薄的透明度最大的做成临时玻片观察。如想短期保
存，可用水或甘油封藏。如希望长期保存所切的材料，则还要经过以
下几个步骤做成永久玻片标本。
3、固定
挑选出符合要求的切片，用毛笔移入盛有 70% 酒精的染色皿中进行
16 分钟或更长时间。
4、染色、脱水、透明
（ 1）用吸水管吸去 70%酒精，染以 1%番红（ 50%酒精溶液）约 30
分钟。
（2）再用吸管吸去番红，换用 70%—85%―95%酒精进行冲洗、脱
水，每级酒精3〜5分钟。（3）复染色。吸去酒精，
用 % 固绿（95%酒精溶液）进行复染色，时间为分钟。
（4）冲洗、脱水。用 95%酒精冲洗 1 次，时间 10 秒。后移入纯酒
精中脱水2〜3次，每次3〜5分钟。
（ 5 ）透明。吸去纯酒精，放入 1/2 二甲苯— 1/2 纯酒精溶液中脱水和
透明 1 次，时间 5 分钟。
（ 6 ）吸去脱水透明液，换以纯二甲苯透明 2 次，时间 5 分钟。
5、封片、贴标签
将已透明材料用镊子或解剖针轻挑于清洁的载玻片上，滴上中性树胶，
盖上盖玻片进行干燥。
在已封好的切片左边贴上标签，注明材料名称、制作日期和制作者姓
名等项，以便查考。
较好的切片，其木质化的细胞壁和细胞核可染成红色，细胞质和纤维
素的壁