文档介绍：细菌培养的基本技术
实验原理
根据某种细菌的营养需要而选择多种原料配制而成的培养基，不仅含有这种细菌生长繁殖所需要的各种营养物质，还要有适宜的pH。本实验所用的牛肉膏蛋白胨培养基，应用较广泛，适于芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等多种细菌的培养。
培养基
液体培养基
固体培养基
培养基的成分：
水、碳源、氮源、无机盐、生长因子
配制好的培养基必须经过灭菌。灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞、芽孢和孢子。对不同的材料，应当采取不同的灭菌方法。培养基一般采用高压蒸汽灭菌法，就是将待灭菌的培养基放入密闭的高压蒸汽灭菌锅内，通过加热使锅内的水沸腾并产生水蒸汽。当水蒸汽将锅内的冷空气排尽以后，关闭排气阀并继续加热，这时锅内的压力就会升高，最终使菌体蛋白质凝固变性，从而达到灭菌的目的。接种环是用火焰烧灼灭菌的。
将某种细菌接种在彻底灭菌的培养基上，经过一段时间的培养后，就能够得到生长良好的细菌群体，它们在培养基上会呈现出一定的形态特征。
目的要求
1．通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制，了解配制培养基的一般步骤和方法。
2．了解灭菌的基本原理，以及实验室中常用的灭菌方法。
3．初步学会细菌培养的基本技术。
材料用具
芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌、牛肉膏、蛋白胨、琼脂。
天平、角匙、200mL烧杯、试管、漏斗、量筒、玻璃棒、滴管、胶管、弹簧夹、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴、纱布、棉花、牛皮纸、线绳、标签、接种环、精密pH试纸(或pH计)、金属小筐、高压蒸汽灭菌锅、恒温箱。
NaCl、1mol/L的NaOH溶液、体积分数为75％的酒精溶液、蒸馏水。
方法步骤
一、培养基的配制
1．称量
2．溶化向上述烧杯中加入蒸馏水100 mL，用玻璃棒搅匀后，放到酒精灯上加热。当牛肉膏和蛋白胨溶化后，加入琼脂，并继续用微火加热。在琼脂溶化的过程中，要控制火力的大小，并且不断搅拌，以免培养基溢出或烧焦。待琼脂完全溶化后，补加蒸馏水，定容至200mL。
3．调pH
4．培养基的分装
注意：分装时不要将培养基沾在瓶口和锥形瓶壁上，以免引起污染。
5．加棉塞培养基分装完毕以后，在瓶口上加一个棉塞。棉塞能防止杂菌污染，保证通气良好。加棉塞时，应使棉塞长度的2/3在瓶口内，如下图所示。