文档介绍：中山大学
博士学位论文
叶酸靶向载基质金属蛋白酶2反义寡核苷酸磁性纳米复合物治疗
喉癌的实验研究
姓名:许熠铭
申请学位级别:博士
专业:耳鼻咽喉科学
指导教师:谢民强
20100523
叶酸靶向载基质金属蛋白酶匆骞押塑账磁性纳米复合物治疗喉癌的实验研究中文摘要专业:耳鼻咽喉科学博士研究生:许熠铭师:谢民强教授导喉癌是头颈部常见恶性肿瘤,目前手术治疗足其主要治疗手段。然而,近二十年来喉癌患者的五年生存率并无明显提高;而且,晚期喉癌的全喉切除给患者留下严重功能障碍,严重影响了患者的生活质量。如何根治喉癌的同时更好的保护喉功能,是目前研究的丰要方向。随着分子生物学和基因工程技术的发展,肿瘤的基因治疗受到越来越多的重视。目前常用的基因载体主要有病毒载体和非病毒载体两大类。然而,不论病毒载体还是非病毒载体,它们在肿瘤基因治疗中都缺乏良好的靶向性。研究表明,基因载体在靶部位聚集缓慢以及靶部位载体浓度过低是导致基因传输及表达效率不高的主要原因。磁性纳米药物作为一种新的非病毒基因载体,在肿瘤的靶向性上具有良好的优势。磁性纳米药物对肿瘤的靶向性主要有被动靶向、磁靶向和分子靶向。研究表明,直径在韵碌哪擅颗粒在细胞的吞噬作用下,磁性纳米载体携带基因治疗分子进入细胞并释放这些分子,可以实现安全有效的靶向性基因治疗作用。叶酸受体是一种肿瘤相关抗原,在正常组织中很少表达,而在多种肿瘤组织中过度表达,如乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢非黏液腺癌、鼻咽癌等。基于叶酸受体表达的这种组织分布特点,以及叶酸受体与叶酸的高度亲和性,叶酸可作为肿瘤治疗的一个靶点,是目前肿瘤治疗研究的热点。我们课题组前期研究已经成功中笱Р┦宦畚巾文摘要
制备了叶酸靶向磁性纳米药物,并且在鼻咽癌的治疗研究中取得良好效果。本研究拟在此基础上构建叶酸靶向载反义寡核苷酸磁性纳米复合物,通过体内外实验研究其对喉癌的基因治疗效果。本研究包括下述四个部分:第一部分,采用免疫组织化学和免疫荧光方法分别研究叶酸受体在喉癌组织和细胞株中的表达情况。结果显示./暮戆┳橹瓯颈泶叶酸受体,晚期喉癌组织中叶酸受体阳性率高于早期喉癌,有淋巴结转移者叶酸受体阳性率高于无淋巴结转移者,⒛炅涞纫蛩匚廾飨韵喙亍一赴ど锨阳性表达叶酸受体,阳性细胞数ァU庑┙峁崾疽砸端崾芴遄魑0械愕囊物可用于喉癌的治疗。第二部分,。结果显示喉癌组织中甀和阳性表达率分别为.//浔泶锍度与喉癌的局部侵袭和淋巴转移具有密切关系。这些结果为我们进行喉癌的基因治疗提供了分子生物学基础。第三部分,将醛基化海藻酸钠改性的叶酸靶向磁性纳米载体与反义寡核苷酸耦联,成功制备了载反义寡核苷酸的叶酸靶向磁性纳米复合物。采用普鲁士蓝铁染色、上窦际鹾屯干涞缇档燃觳庹庵执判阅擅赘春衔锒喉癌细胞的体内和体外靶向性能。结果显示该纳米药物对喉癌细胞和裸鼠皮下移植瘤有良好的靶向性。第四部分,通过体内、外实验研究了叶酸靶向载反义寡核苷酸的磁性纳米复合物对喉癌的基因治疗效果。体外实验中,、産体外侵袭实验显示,该纳米复合物能够显著减少赴蠱的表达,并抑制细胞的侵袭能力。。体内实验显示叶酸靶向载反义寡核苷酸磁性纳米复合物治疗组的裸鼠移植瘤平均瘤重较对照组有所减少,抑瘤率为.%,,单纯抑制基因可能无法抑制肿瘤生长,或者其影响程度较小,需要中山大学博貉宦畚中文摘要
更大样本量才能检测出来。本研究的主要创新点:初步确定了叶酸受体在喉癌组织和细胞株中的表达情况;ü内、外实验证明该复合物对喉癌有良好的靶向性和基因治疗效果。关键词:喉癌,磁性纳米复合物,叶酸受体,基因治疗,基质金属蛋白酶中山大学博士学位论文中文摘要
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