文档介绍：动物细胞工程
专题2 细胞工程
◆动物细胞培养
◆动物细胞融合
◆单克隆抗体制备
◆动物体细胞核移植技术和克隆动物
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动物细胞培养
动物细胞融合
单克隆抗体技术
核移植
动物细胞工程常用技术
其它动物细胞工程的基础
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一、动物细胞培养
二、核移植技术
本节内容：
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一、动物细胞培养的应用和概念
1、概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
2、原理：细胞增殖
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定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
胰蛋白酶处理
取出组织
胚胎或幼龄动物器官组织
剪碎
分散成单个细胞
细胞悬液
转入培养瓶内培养 （ 贴壁生长长成单层细胞。有接触抑制现象）。
①原代培养
3、过程
图示
原代培养
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强调一：细胞贴壁过程
■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于贴附。
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■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
强调二：接触抑制
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定义：
当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程）
②传代培养
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▲细胞株：传代细胞一般能传到40-50代，遗传物质一般不会发生改变，叫细胞株。
强调：细胞系、细胞株（了解即可，老课本体系）
▲细胞系：传代50代以后不能再传下去，部分细胞遗传物质发生了改变，能连续传代，获得不死性，叫细胞系。
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3、总结：动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
配置细胞悬液
剪碎用胰蛋白酶处理
10代细胞
转入培养瓶
40-50代细胞
传代培养
无限传代
分散成单个细胞
加培养液稀释
传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。
传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变）
为什么用胰蛋白酶处理？
分瓶培养
原代培养特点：细胞贴壁、接触抑制
继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。
细胞株：一般说遗传物质未改变
细胞系：遗传物质已改变
原代培养
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