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体外诱导脂肪干细胞向表皮细胞分化研究.pdf

文档介绍

文档介绍:内蒙古医学院
硕士学位论文
体外诱导脂肪干细胞向表皮细胞分化的研究
姓名:董晓红
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:王文礼;于宏升
20060501
③条件培养基诱导欤诽跫嘌/嘌天组;④%的细胞数较趟④组中处于/诘南赴飨韵陆,脚∞组中处目的培养和鉴定大鼠脂肪干细胞秔魇较赴跫觳釧目中ⅰ泶锏难粜月史直鹞.%、.%,ⅰ谋泶锏难粜月史直鹞狾.%、ィ幌赴庖呋摘中文要,鵯教种干细胞跨胚层向表皮细胞分化的可能性。方法取大鼠脂肪组织,用酶消化法分离、培养昧魇较赴醴ā⒚庖呦赴Хḿˋ【的表面标志;诱导的实验分为椋孩偬跫嘌盏天组;②条件培养基加入/甜盏天组;培养煳6哉兆椤S盏己缶魇较赴跫觳釩谋泶铮幌赴疫化学法检测的表达;流式细胞仪检测①组和④组细胞周期;观察各组细胞形态测示:条件培养基诱导熳椤⑻跫嘌盏天组、条件培养基诱导欤阳性率明显升高,、条件培养基诱导欤诽跫嘌/培养熳榉直鹩胩跫嘌盏化学法检测各组的表达与流失细胞术所测结果吻合。舢①组中处于/⒑笙胞形态无明显变化。结论鉴定结果显示:所分离培养细胞的表面标志与文献报道的谋砻姹曛疽恢拢痪盏糀具有向表皮细胞分化的潜能。关键词脂肪于细胞;培养;鉴定;表皮细胞;分化的变化。结果法显示诎谐室跣员泶铮鳦诎谐恃粜员泶铩流式细胞术检条件培养基,改%疍嘌天组分别与对照组相比、/表达的天组相比、/的阳性率明显降低,。
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体外诱导脂肪干细胞向表皮细胞分化的研究问允质干细胞有相似的表达标志;另也有所不同:表达⒉槐泶顲,而窭錾直蜃兰堕亟±盟窭生兰焦迨塞塑把脂肪组织广泛分布在人体皮下和重要脏器周围,发挥着储存能量、动力缓冲和保温等多种生理功能。近几年人们不断探索脂肪组织的新用途。由于脂肪组织同骨髓均来自中胚层且都含有易分离的基质成分,人们设想脂肪组织中可能存在与骨髓基质细胞有类似生物学性质的干细胞【⒍源苏箍A搜芯俊陑和状未尤顺橹中抽取的脂肪组织悬液中分离获得了形似骨髓问充质干细胞的多向分化干细胞,并利用各相关因子的表达排除了分离细胞中吉有脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌细胞等的原代细胞的可能,由混杂的骨髓基质细胞所致的可能亦被排除㈦。尽管曾出现多种命名,现普遍称该脂肪分离细胞为脂肪干细胞。珹&啊V靖细胞的研究得到了更多学者的关注。文献报道砻姹泶顲、等,提示与骨髓骨髓间充质干细胞却相反,即不表达⒈泶颿,,,“。在体外培养条件下,能传代或代以后仍保持其表面抗原表型不变。进一步的研究表明,哂锌缗卟惴只那蹦埽赐ü盏疾唤隹煞只V信层来源的成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞等,还可分化为外胚层来源的神经元样细胞神经元样细胞和表皮细胞均属于外胚层。既然舢可以跨胚层分化为神经细胞,那么设想:体外在一定的条件下是否也具有分化为表皮细胞的能力呢庥涉及到分化机制的问题。关于分化机制的研究,多数观点认为谔迥诘姆只它所定位的部位有密切关系。也就是说,姆只胛⒒肪趁芮邢喙亍?赡苁翘迥不同组织的微环境“壁龛敝泻胁煌囊蜃樱俳氩煌橹腁】获得靶组织的表型,从而向不同谱系分化⋯。这给予我们提示:体外的诱导分化必须也应该靶组织的表型,从而向不同谱系分化““。这给予我们提示:体外的诱导分化必须也应该遝,”。.
、、、、/鼠抗鼠抗体:舭公司,⒂邢薰,诲篐公司,美国福篠阛公司,美国直錾直匡堂堕堡±班壅生堂垡迨塞簧﹊生模拟体内微环境。将大鼠皮肤匀浆液加入到嘌逑担糠帜D獗砥は赴さ奶迥诨肪常测皮肤匀浆液含有的因子可能诱导硇透谋洌幢泶锉砥は赴硇汀主要设备与仪器型跸洌篎偷怪孟晕⒕担篖公司,德国细胞培养试剂与材料培养基::福州迈新试剂公司流式细胞仪检测试剂℃标记的羊抗鼠篠公司,美国笛椴牧公司,美国退纳魇较赴牵築。荆拦偷退倮胄幕罕本┮接美胄幕缛群阄滤孪洌罕本┮搅粕璞赋实验动物大鼠,雄性,:公司,,⑾赴嘌孑:.
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