文档介绍：基因工程: 按照预先设计好的蓝图, 利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术, 对遗传物质 DNA 直接进行体外重组操作与改造,将一种生物(供体)的基因转移到另外一种生物(受体)中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。遗传工程:广义: 指以改变生物有机体性状为目标, 采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作,以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义:基因工程。限制性核酸内切酶:是可以识别 DNA 的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA 的一类内切酶,简称限制酶回文结构: 每条单链以任一方向阅读时都与另一条链以相同方向阅读时的序列是一致的,例如 5'3' ATGG5'. 同裂酶(isoschizomer) 或异源同工酶: 不同来源的限制酶可切割同一靶序列(BamH I和Bst I具有相同的识别序列 G↓GATGC ) 同尾酶(isocaudiners) : 来源不同、识别序列不同,但产生相同粘性末端的酶。两个同尾酶形成的黏性末端连接之后,一般情况下连接处不能够再被其任何一种同尾酶识别。 BamH I识别序列: G ? Bgl II识别序列: A ?GATCT 黏性末端(cohesive terminus/sticky ends) :DNA 末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的 DNA 末端通过互补配对粘合,这样的 DNA 末端,称为黏性末端。平末端( blunt ends ):DNA 片段的末端是平齐的。星活性( star activity ): 指限制性内切酶在非标准条件下, 对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应,导致出现非特异性的 DNA 片段的现象。易产生星活性的内切酶用*标记。如: EcoR I* 底物位点优势效应:酶对同一个 DNA 底物上的不同酶切位点的切割速率不同。连杆/ 衔接物( linker ): 化学合成的 8~12 个核苷酸组成的寡核苷酸片段。以中线为轴两边对称,其上有一种或几种限制性核酸内切酶的识别序列,酶切后可产生一定的粘性末端,便于与具有相同粘性末端的另一 DNA 片段连接。衔接头/ 接头( adaptor ): 化学合成的寡核苷酸,含有一种以上的限制性核酸内切酶识别序列。其一端或两端具有一种或两种内切酶切割产生的黏性末端。激酶:对核酸末端羟基进行磷酸化的酶。载体:指能够运载外源 DNA 片段(目的基因)进入受体细胞,具有自我复制能力, 使外源 DNA 片段在受体细胞中得到扩增和表达,不被受体细胞的酶系统所破坏的一类 DNA 分子。克隆载体(cloning vector) :用于在受体细胞中进行目的基因扩增的载体。表达载体(expression vector) :使目的基因在宿主细胞中得以表达的载体。穿梭载体(shuttle vector) :能在两种不同的生物体内复制的载体。质粒( plasmid ):指独立存在于宿主细胞染色体外、能够自我复制的 DNA 分子。严谨型质粒(stringent plasmid) :拷贝数为 1至几个的质粒。松弛型质粒(relaxed plasmid) :拷贝数多于 10个的质粒。接合质粒(conjugative plasmid) : 指质粒所携带的基因的功能是使细胞彼此有效地接触,以便将质粒 DNA 从供体细胞