文档介绍：肝郁证模型大鼠蓝斑蛋白质组差异表达研究学位申请人广州课题来源:
肝郁证蚴蔓塞字首必差异表达研究』·,¨博士研究生:夏欧东指导老师:吕志平教授摘要研究背景:学的一个特有概念,是对疾病过程中所处一定阶段的病位、病因、病性以及病势所作的病理性概括。证是机体内因和环境外因综合作用的机体反应状态,随近年来,随着基因组测序工作的完成,人们研究的重点已经从基因转移到蛋白质功能方面,蛋白质在疾病的发生发展中承担着重要的角色,这使得蛋白织,一个细胞等不同层次“整体”的蛋白质活动的角度,来揭示和阐明证候形成和发展的基本规律。其理论和技术特点以及其整体、动态性的核心思想,与宁、胸胁闷胀或易怒善哭为特征的一类临床病证,常见于临床多种疾病。临床辨证论治是中医学的特色和精髓,突出了个性化的中医思路。“证”是中医着病程的发展而不断发生变化。证是对疾病当前本质所作的结论。因此,证的研究是中医学现代化研究的核心内容。质组学在人类疾病的研究中有着极为重要的价值。蛋白质组学是一门在整体水平上高通量、大规模地研究蛋白质组成及其动态变化的活动规律,从而得到疾病、生理生化过程中的整体情况的新兴学科。蛋白质组学从一个机体或一个组中医学的“整体观”和“辨证观”等理论体系有很大的相似性,这种研究思路与中医整体观和中药多靶点整合调节的特点不谋而合,具有明显的中医特色。肝郁证是由于肝的疏泄功能异常,疏泄不及而致气机郁滞所引起的情绪不博士学位论文
流行病学调查显示,肝脏病证在五脏病证中占总体病证的%,而肝郁证又是肝病证候的核心,也是中医肝病发病学的重要环节,因此肝郁证的本质研究一消化、免疫等多系统多器官的病理改变。,其方证研究也一直是其本质研究的一个重要方面。物疾病模型,然后给予预设的方药,选择和疾病证候相关的差异指标,通过对步的证据,并对进一步研究肝郁证的本质打下一定的基础。直是中西医结合领域研究的热点。近年来对肝郁证本质的研究颇多,己初步证实肝郁证具有现代病理生理学基础,并部分地阐释了中医理论的科学性,取得了阶段性成果:认为肝郁证和应激密切相关,并涉及机体神经、内分泌、循环、腺皮质系统,,研究较多,“以方测证,方证互参”的特点。一方面通过辨证的结果来确立相应的治法方药,一方面又根据方药的组成和功效来推测疾病的病机和症状。理论上讲,每一个方剂都有自己使用的病证,只有当其功效与疾病的病机相应时,方剂的效用才达到最佳。通过这一特征,我们可以通过建立预设的动用药后动物的观察和研究,确认该模型是否为预设的疾病模型。同时,在确定模型的情况下,选用特定方剂,通过观察差异指标,可以证实该方剂是否是治疗此病证的有效方剂。因此,本课题以蓝斑为切入点,通过蛋白质组学进行差异蛋白鉴定,并从中选取鉴定出的已知蛋白羧肽酶种萍痚,沉默信息调节基因,,转体基因蛋白,,进行进一步的验证,并通过逍遥散进行反证,同时选用了西药阳性对照盐酸氟西汀魍∈橇俅簿淇挂钟粢捎行Ц纳闷闷不乐,兴趣减退等肝郁证症状M@栋吆透斡糁さ南喙匦蕴峁└摘要畇.
研究目的:采用孤养加慢性不可预知温和刺激备肝郁证大鼠模型,观察肝郁证大鼠在一般状态、行为学及从蛋白质的角度,对肝郁证模型大鼠蓝斑组织蛋白质组的差异表达进行比较分析并进行验证,从标体系奠定基础,也为从临床疾病的角度对肝郁证相关蛋白质组的全面研究提供技术和理论支持。并通过比较逍遥散组和氟西汀组与模型组大鼠之间的蛋白表达差异,探讨逍遥散对肝郁证的作用机理,并以方测证,方证互参,,结合基质辅助激光解吸电飞行时间质谱技术分两次造模,第一次用于差异蛋白的检测和鉴定,第二次用于蛋白功能的验证。参照相关文献报道,从慢性心理应激的角度出发,将只雄性大鼠随机分为正常组,模型组,逍遥散组,每组第二次为只,分组增加盐性不可预知温和刺激,每天危中周。逍遥散组在模型制备的基础上加用逍遥散干预,氟西汀组加用氟西汀干预,正常组不给任何干预,群养。,动物模型的角度找到肝郁证相关的蛋白质组群,从而为建立证候的微观辨证指证本质的阐述提供客观依据。研究方法:本研究在肝郁证理论指导下建立孤养加肝郁证大鼠模型。并运用蛋甅,分析模型组大鼠蓝斑组织的蛋白质组和正常组大鼠之间的表达差异。⒐卵覥斡糁ご笫竽P偷慕酸氟西汀组,每组只3W橥猓渌髯榇笫缶チ茄⒏杪⒌鞍字恃镜奶崛『脱净旌以液氮研磨蓝斑组织,低温裂解蓝斑细胞,提取蓝斑组织的蛋白质样本。采用ǘ缘鞍字恃窘卸俊6宰槟