《活性污泥宏基因组dna提取方法优化-论文》.pdf

文档介绍：第 卷 第 期 大 连 理 工 大 学 学 报 ．， ．
年 月 ．
文 章 编 号 ：———
活 性 污 泥 宏 基 因 组 提 取 方 法 优 化
苟 敏 ， 曲 媛 媛 ， 周 集 体 ， 曹 湘 禹 ， 许 炳 雯 ， 王 腾
大 连 理 工 大 学 工 业 生 态 与 环 境 工 程 教 育 部 重 点 实验 室 ，辽 宁 大连
摘 要 ：宏基 因组 的成功获取是宏 基 因组 学技术 顺利开展 的关键．利用 溶菌酶一蛋
白酶 法 法提 取 活 性 污 泥 宏 基 因组 ，结合 单 因素 法 与表 面 响 应 法 对 提 取 过 程 的
个 关 键 步 骤 进 行 条 件 优 化 ，即 预 处 理 、细 胞 裂 解 、蛋 白 去 除 及 沉 淀 过 程．确 定 影 响
产 量 的 重要 因 素 ：预 处 理 缓 冲 溶 液 与 沉 淀 剂 类 型 、质 量 分 数 、溶 菌 酶 浓 度 、
℃ 水 浴 时 间及 质 量分 数 ．确 定 法 提 取 宏 基 因组 的最 佳 条 件 ：预 处 理
活性 污 泥 ；． ；．／溶 菌 酶 ，℃ 水 浴 ．； ，／／ 蛋 白酶 ，
℃ 水 浴 ．；异 丙 醇 沉淀 ．在 最佳 条 件 下 ，活 性 污 泥 宏 基 因组 的 最 大 产 量 为
每 污 泥 ．本 研 究可 为 环 境 样 品 中高 质 量 宏 基 因组 的 提 取 提 供 有 价 值 的参 考 ．
关键 词 ：宏基 因组 ；活性 污泥 ；单 因素法 ；表面 响应 法
中图分 类号 ： 文献 标志 码 ：
引 言 值 的优 化．在有 限 的实 验 次 数 下 ， 不 仅 能够
描述 每个 因子 的 影 响 ，同 时还 能反 映 多种 因素 间
研 究表 明 ，利 用纯 培 养 技术 可 培 养 的 微 生 物