文档介绍：大连理工大学
博士学位论文
栀子组织和悬浮细胞培养及其多糖的分离纯化和生物学活性的
研究
姓名:石若夫
申请学位级别:博士
专业:生物化学工程
指导教师:王关林
20020501
摘要多糖是生物化学领域中的一个重要课题,并正在成为新的研究热点。到目前高免疫能力,抗病毒,抗菌,抗氧化等多种生物学活性。本论文研究了桅子多糖的分离纯化及部分生物学活性,并探讨了通过生物技术生产栀子多糖的可行性。瘤的抑制率为%,口服给药的效果好于注射给药。%。一些金属离子的存在可以改变栀子多糖对自由基的清除能力。”、和能不同程度地削弱栀子多糖对超氧阴离子的清在利用悬浮细胞生产栀子多糖的研究中,通过选择栀子多糖的高产细胞株系以及改变培养基和培养条件来增加细胞的生长和多糖的百分含量。结果表明,细天的继代周期有利于细胞保持快速分裂和多糖合成的能力;琇的接种量则大糖和果糖,栀子细胞优先利用葡萄糖,培养后期多糖合成量的下降主要与培养基长素对栀予细胞生长和多糖合成有促进作用,籇效果优于琋又优为止,己有很多关于植物多糖,特别是中草药多糖的报道。人们发现多糖具有提桅子是传统中药,其多糖在抑制肿瘤生长和抗氧化过程中起重要作用。痬蔫僮佣嗵窃谔逋饪梢砸种芐肉瘤细胞、甪腹水肝癌细胞、人红自血病细胞。栀子多糖在活体中对猣肝癌实体栀子多糖对超氧阴离子自由基有很好的清除效果,清除率高达羟自由基的清除率却只有除能力,只有可以稍稍提高栀子多糖对超氧阴离子的清除能力。而这四种金属离子都能促进栀子多糖对羟自由基的清除作用。在实验动物体内,栀子多糖能增加傅幕盍Γ档蚆的含量,同时这种改变与肿瘤的生长有密切的关联。富钚郧康男∈螅琈含量低,肿瘤轻;富钚匀醯男∈螅琈含量高,肿瘤重。因此栀子多糖可能是通过提高小鼠体内瓤寡趸傅幕性,来清除多余的自由基,从而达到抑制肿瘤生长的目的。胞聚集体大小并不影响栀子多糖的合成,细胞团内部存在着物质传递结构;大缩短了细胞生物量达到最大值的时间;在悬浮培养中,蔗糖可迅速分解成葡萄碳源供应不足有关;氮源浓度过高不利于栀子多糖的合成;在激素的使用上,生于昏僮酉赴约羟辛Σ皇呛苊舾校¨墙峡矸段诙寄苷%,而对摘要
温度和值等物理因素的影响与其他植物悬浮培养细胞无太大差异。于细胞生长的条件很可能不利于栀子多糖的合成和积累。栀子多糖一般在悬浮细胞培养的初期形成,栀子黄色素则最早在培养的第天开始合成,因此通过培取的干扰,即通过改变培养条件抑制栀子黄色素的合成,并在栀子黄色素产生之结果发现,用倍体积的碱水在℃下提取∈保倬幌盗写嘉觥⑼焉和脱蛋白等处理,栀子果实多糖的得率为ィ俏南妆ǖ赖倍。纤维素柱层析可以将栀子多糖分成分予量分别为,的两种,它们在结构上只是略有差异,分子量为,蔫僮佣嗵呛刑侨┧幔撬窃中最少。在悬浮细胞中栀子粗多糖的百分含量约为%左右,纯化后为ィ生长:红色光和蓝色光是栀子悬浮细胞生长和多糖合成的两个重要的单色光;而尽管桅子悬浮细胞培养有许多富于个性的特点,但是有一个总的规律,即利养条件的调整以及收获时间的改变,能有效地排除栀子黄色素对栀子多糖分离提前收获细胞,提取栀子多糖。我们采用了正交实验设计确立了栀子多糖的提取和法除蛋白的条件,生物学活性上没有太大的差别。栀子多糖主要分布在果实中,其次是叶,茎和根并且证实与栀子果实中的多糖有相同的生物学功能,可以用于工业化生产,以缓解有限的资源问题。大连理工大学博士学位论文
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第一章文献综述僮佑行С煞盅芯康慕栀子属植物,全世界共有多种,主要分布于热带和亚热带丛林地区,在我国主要分布在浙江、江西、广西、湖北、湖南、海南、四川和福建等学用它主治热病心烦、目赤、黄疸、吐血、衄血、热毒疮疡等症。在民间用栀予等人开始对栀子树胶康氖髦唇鑫进行研究以来,至今中外植化工作者已对该属植物中的余个品种进行了植化研究。最初对该属植物的研究仅限于从中分离桓事洞和色素,如藏红花到目前为止,从该属植物中分离鉴定的化合物有数十种之多,其中该属的特征性化合物就有种,包括黄酮类个,环烯醚萜类个,三萜类个,有机酸酯类觥4送猓褂谐ち赐樘㈢薮祭唷⑷圃磉袄唷一甘露醇、醇、多糖以及色素等。有关栀子化学成分的最新研究主要集中在环烯醚萜目前栀子商品中还有同属的植物水栀子等品种作扼子药羽1疚乃驳蔫僮咏鲋干借儆栀子是茜草科植物的干燥成熟果实,是传统中药荚赜凇渡衽┌俨菥妨形V衅贰!侗靖锔倌俊分卸源艘嘤邢晗傅募鞘觥>载,栀子果实味苦、性寒,有泻火除烦