文档介绍：四川农业大学
硕士学位论文
PCR和核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究
姓名:代敏
申请学位级别:硕士
专业:预防兽医学
指导教师:王红宁
20030601
舭牧聊腿锞辏氚暌┡。ァ要验,测定了它粥对霞环素类抗藏素匪亍ⅰ烂顾亍⒔鹈顾静最低撵蓠浓度瓹接搬据文献缀遘及米⒙创滥醵餭蒸嚣痔弼设诗弓铮谙谛畲侮技巍⒄阪骼丛粗帽9叵捣肿ū黻秚粲形薅√涡汀壤、缝瑗来源无翳本研究应用平板稀释法对规模化猪场分离的株猪源致病性沙门氏菌进行药敏试参照美国临床实验室标准委员会谋曜迹卸ň甑哪鸵┬浴=峁明,株致病性沙门氏菌对四环素类抗菌素产生了普遍耐受憔,耐药率达ィ渲低耐药菌株辏腿靯药率.%。且沙门氏菌对四环素类抗菌素存在交叉耐药性,帮一照沙门氏蘧越疆塔素类枣戆一静撬生素产生嚣药性,慰将黠司类其它晶耱抗生素媳术对株猪源致病性沙门氏黼的四环索耐药藻因进行了扩增,结果在以染色体为模板的扩增体系中,采觅有特弹性产秘;在戬质粒为横板的扩增体系中,株菌株获得特异性扩增产物,扩增产物大小约胼悦羰匝榈淖柰斗下蚀ィ哂薪细的检出率,表明猪沙门氏菌四环素耐药基因只存在于质粒上。对罱逍汀显相关性。对来源不同、捣直鹞痬和。的猿蓦捧盼┤啦慕辛未鮣裁定,并与篔的四环素耐药基因进行序列比较,结果袭明,┰霾锝斜昙牵各核酸探针,用菌落琢位杂交对猪源致病性沙门氏菌的蕊因进行了检测,并对杂交条缅嘈杏呕=峁鳎鹗苁月炊俺授钔埽株受试麓株呈弱性,与癫结果阳性符合率达.%,其有较好的重复能,制备的搛针具有较高的特异性和灵敏凌。本研究通过试验条件的筛选和优化,建变的猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因豹院怂岵敕婕窠︳攘悖ㄗ尤锬R谥沓∩趁攀下傣;匪啬鸵┏啼舴肿庸行病学监测。关键词:沙门氏蓠西环索耐药蒸凿核酸探赞检测产生耐药性。本研究获。十五”鬻家科技玻关谋麓项黼赘助摈氡嗪牛。
「攀沙门氏茵病怯缮趁攀暇鹑撕投嘀侄锔腥镜募毙源静。也是我国常见的细菌性疾病之一,临诊上多以败血症和肠炎为特征。自年和掷氲街砘袈疑趁攀暇岳矗陨趁攀暇〉难芯坷芬延邪儆嗄辏裎V梗世界上已发现沙门氏菌有二千五百多种血清型,其中只有十个以内的罕见血清型属于邦戈尔沙门氏菌,其余均属于肠道沙门氏菌,我国自年代中期,开展了全国性的沙门氏菌血清型调查,己发现有二百多种血清型【縪猪沙门氏菌病又称猪副伤寒,常发于月龄以下的仔猪,以铝涠喾ⅲ俅采峡煞治<毙败血症⒀羌毙院吐匀类型,本病常引起较高的死亡率,其中败血型病死率达%,慢性型病死率达%ィ给养猪业造成巨大的经济损失。在临床中,除应用疫苗进行免疫预防外,主要应用抗菌素给予防治,但由于猪致病性沙门氏菌血清型的多样性以及大量耐药菌株的存在和流行,使得本病成了规模化猪场疫病防制中的一大难题,严重困扰着养殖业的健康发展。因此,有效地进行本病的防治已成为规模化养猪生产中亟待解决的重要问题。我国猪沙门氏菌感染率很高,且在屠宰中往往污染猪肉,引起人沙门氏菌感染,导致人类疾病。国内外研究表明口一】,全世界人沙门氏菌感染有逐渐上升的趋势,在美国,沙门氏菌感染在人感染性疾病中居前十位,在法国,沙门氏菌在食品污染中尤为严重。据报道,由沙门氏菌引起的医院内感染和食物中毒不断增多,沙门氏菌成为肠炎的最常见病原菌,感染菌型主要以肠炎沙门氏菌和伤寒沙门氏菌为主;沙门氏菌食物中毒是所有食物中毒中最常见的一种,据统计约占细菌性食物中毒的./ィ食物中毒中占据首位或第二位,为此,趁攀暇腥刖哂醒现匚:椭械任:的食物传播性病原。研究还发现,随着人类沙门氏菌感染的不断增加,伤寒沙门氏菌已成为世界性肠炎最流行的细菌之一,尤其是噬菌体型ǔ1硐殖鱿嗤哪鸵┓式:即同时对氨苄青霉素⒙让顾、链霉素⒒前⑺环素鸵一】。正是因为沙门氏菌耐药菌株的不断增多,导致该病的发病率不断上升、病情加重、死亡率增加。因此,控制沙门氏菌感染在兽医、┫肿等方面都具有重要的意义。
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