文档介绍：华中科技大学同济医学院硕士毕业论文
中文摘要
目的应用基因芯片技术分别研究原发性肝癌和肝硬化相关基因的基因表
达谱。
方法乙肝肝硬化和原发性肝癌组织为实验组,前者以正常肝组织为对
照,后者以乙肝肝硬化组织为对照。按一步法抽提实验组和对照组标本的总
并纯化将等量的实验组和对照组标本分别逆转录合成荧光分子掺入
的做探针,混合后杂交点芯片。经严格洗片
后用扫描仪扫描芯片获取荧光信号图像,计算机分析后比较两种
中差异表达的基因
结果在种基因中,肝硬化组织与正常肝组织间存在差异表达的基因。
所检测的例临床标本中,例共有的差异表达基因条例共
有的差异表达基因条。其中包含有与细胞外基质降解相关的基因,与
细胞生长因子有关的基因,与信号传导有关的基因等等。在种基因中,原
发性肝癌和肝硬化组织间存在条差异表达的基因。对例肝癌基因表达谱进
行聚类分析,分组与肿瘤分化密切相关,共有,条基因可能参与肝癌的分化挤
结论我们的研究有助于深入阐明肝硬化和肝癌在基因表达水平上的变化
和进一步认识乙肝相关性肝硬化转化为肝癌的分子机制,为肿瘤分型、分子诊断
和寻找治疗靶基因提供了新的线索。
〔关键词基因芯片。二癌肝硬化物淮异表达
、、、、属、瓤
华中科技大学同济医学院硕士毕业论文

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华中科技大学同济医学院硕士毕业论文
第一部分基因芯片筛选肝硬化相关基因的研究
肝硬化是一种常见的慢性肝脏疾病,它对人类的健康危害极大。最常见的是
门脉性肝硬化,在我国,门脉性肝硬化主要由病毒性肝炎引起,特别是慢性活动
性乙型肝炎。近十多年来,基于分子水平研究技术的进步,人们对肝硬化的发生、
发展及恶化机制有了一定的认识,但其详细机制仍未完全阐明。随着人类基因组
计划的开展和分子生物学、分子遗传学的迅速发展成熟,人类对许多疾病的认识
已深入分子水平。寻找一种更高效、更迅捷的研究方法至关重要。基因芯片是将
靶基因片段或寡核昔酸按矩阵高密度地合成或点在玻璃、硅片等载体的设置区
域上,,将待测样品用荧光染料标记制成探针后与芯片杂交,杂交信号用激光扫描
仪检测,计算机软件分析检测结果可获得大里类似于传统实验方法如点杂交
的分子杂交数据,比较各组织间靶基因表达谱的差异,以达到快速、高效、高通
及平行性地分析生物信息的目的。本文利用基因芯片技术研究正常肝组织和乙
肝相关性肝硬化的基因表达谱与筛选肝硬化相关基因,以便深入阐明肝硬化在基
因表达水平上的变化和进一步认识肝硬化组织癌变的分子机制。
材料和方法
一、组织材料
临床经病理证实的例门脉性肝硬化标本患者均有慢性活动性乙型肝炎病
史及例正常肝组织取自交通意外死亡健康成年男子,迅速液氮冻存备用。
二、试剂
水饱和酚,抓仿一异戊醇,十二烷基肌氨酸钠,柠檬酸钠
溶液,乙醇,
水,由公司提供,逆转录酶及缓冲液由
公司提供,酶由上海生物工程服务公司提供,由
公司提供,纯化柱购自公司。
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