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221例健康体检者Septin9基因甲基化检测结果分析.docx

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221例健康体检者Septin9基因甲基化检测结果分析.docx

上传人:科技星球 2021/7/11 文件大小:70 KB

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221例健康体检者Septin9基因甲基化检测结果分析.docx

文档介绍

文档介绍:221例健康体检者Septin9基因***化检测结果分析
 
   
 
 
 
 
 
 
 
     
 
 
 
 
 
摘要:目的了解健康体检者体内Septin9基因***化水平,做好高危人群Septin9基因***化检测,达到结直肠癌的早期筛查目的,提高本地区结直肠癌的综合防治水平。方法选自2018年2月至2020年8月我院体检中心健康体检者221例,分析Septin9基因***化检测结果。结果发现健康体检者Septin9基因***%(11/221)与文献报道一直。结论在高危人群中推广Septin9基因***化检测,提高结直肠癌的早期筛查率,是提高结直肠癌早诊早治、降低结直肠癌死亡率的有效途径。
关键词:Septin9基因***化;结直肠癌;早期筛查
在中国结直肠癌的发病率与死亡率逐年上升,结直肠癌的发生、发展是一个多因素影响、多基因参与并需经历多阶段演变的复杂过程,肠癌发展进程由增生、小腺瘤、大腺瘤、重度非典型增生、早期腺癌、晚期腺癌等阶段,大约需要5-10年的疾病发展期,临床症状出现时间晚,国民早期筛查意识差,无症状不检查,往往错过最佳治疗期。目前结直肠癌体外筛查的方法有CEA、粪潜血和肠镜检查。CEA、粪潜血灵敏度较低,肠镜筛查虽然是临床筛查肠癌的金标准,但流程复杂、创伤大、风险高、左右结肠有差异、恐惧意识、人为误差,加之肠镜诊断的准确性和治疗的安全性很大程度上取决于肠道准备的质量等,使肠镜的受检率低于3%,不适合早期筛查。我院自2018年1月引进Septin9基因***化技术并在结直肠癌早期筛查及高风险患者推广应用,现总结如下:

选自我院2018年1月至2020年9月在体检中心健康体检者221例,年龄在31-66岁之间,男性平均年龄49岁,女性平均年龄48岁。

标本采集与处理:采用EDTA-K2抗凝负压采血管采集外周静脉血10m L, 在采血4 h内进行2次1350×g离心12 min, 完成血浆分离, m L血浆样本置-20℃保存, 实验在4周内完成检测。
:+ 裂解液,涡旋混匀,RT静置10min;加入90ul混匀磁珠、,颠倒混匀5-6次,10-20rpm旋转混匀40-50min;取下15ml离心管,置于磁力吸附架;弃上清,,涡旋重悬磁珠,,置于磁力吸附
架上,吸附磁珠,弃上清;短暂离心,再次吸弃上清;加入100ul洗脱液,涡旋混匀,80℃ 1000rpm震荡10min;短暂离心,置于磁力吸附架,(4℃可保存24h,不可冷冻);加入150ul亚硫酸盐溶液、25ul保护液,涡旋混匀,80℃ 静置孵育40-50min;降温震荡仪至23℃;离心管中加入1000ul洗液A,20ul磁珠,涡旋混匀,23℃1000rpm震荡40-50min;短暂离心,置于磁力吸附架,弃上清;加入800ul洗液A,涡旋洗涤磁珠,离心吸附弃上清;加入800ul洗液B,涡旋洗涤磁珠,离心吸附弃上清;加入400ul洗液B,涡旋洗涤磁珠,离心吸附弃上清;再次离心吸附弃上清x2;室温干燥10min;加入60ul洗脱液,涡旋混匀,