文档介绍：在雌激素变化参与的皮肤衰老过程中的作用机制研究临床医学培养层次所在学院南方医科大学研究生院学位申请人谭拯导师姓名李勤专业名称培养类型专业型年展阒軮南方医科大学级硕士学位论文课题来源:广东省科技计划项目,编号萍に赜肫し羲ダ系墓叵导盎频难芯硕士
肤衰老中的作用机制研究骨形态发生蛋白诖萍に乜谷ナ拼笫笃摘要第一部分诖萍に乜谷ナ拼笫笃し羲ダ现械淖饔研究机制及皮肤组织病理学变化提供实验依据。氯醛后背部净毛,在背部脊柱两侧分别取全层皮肤,主要为真皮成分,共切割目的探讨雌激素水平对皮肤组织的影响,为临床上绝经后妇女皮肤衰老的发病方法只雌性成年大鼠,随机分为去势组琈,⒓、去势萍に刈琌,喝ナ谱榍谐ú嗦巢,大鼠术前禁水,取ニ下热/腹腔注射,麻醉后固定四肢,在脊柱两侧第肋尾侧剪毛,⒎掷爰∪狻⒋蚩1诓愀鼓ぃ进入腹膜腔,找到卵巢并切除。假手术组步骤同去势组,但不切除卵巢,只切除卵巢周围小部分脂肪组织。去势萍に刈椋呵谐笫笏ú嗦殉埠螅谑鹾蟮炜J计は伦⑸浯贫./中天。大鼠饲养芎蟾骨蛔⑸渌鲈残未疵妫本.,深至皮下,内、外两侧分别做染色标本和免疫组化标本。采用放射免疫方法检测了血清雌二醇水平,免疫组化方法检测了皮肤组织蛋白的表达;应用光学显微镜对皮肤组织形态和超微结构进行了观察,,分析大鼠皮肤中虸硕士学位论文
胶原的含量以及疘胶原的比例,所有数据采用ナ谱榇笫笪寡周后皮肤组织各层的细胞萎缩,导管周围的结缔组织纤维增加并出现纤维化,部分腺泡失去正常结构,主要表现为组织结构排列紊辔端幔炖切珊旆ǚ⑾.臣迫砑型臣学处理。。乱,细胞体积变小,细胞核没有明显变化,细胞质明显减少,细胞核密集在一起,腺泡呈现出萎缩的状态;⑾,降低真皮的厚度及弹性,这可能是雌激素水平降低导致皮肤衰老的发病机制。摘要关键词雌激素;皮肤;衰老;去势;骨形态发生蛋白
第二部分雌激素对体外培养的皮肤成纤维细胞表达的影响目的方法肤组织后,用ヒ鹊鞍酌赶褰嗥し舯瓯荆。跫伦饔,分离表皮和真皮组织,弃去表皮组织后,把其余的真皮组织用含ソ涸傅娴/,以的比例进行传代,在孵化箱中培养拮抗剂张ǘ痬;第槲4萍に卮通过研究雌激素对体外培养的皮肤成纤维细胞蛋白的影响,探讨雌激素减缓皮肤老化的机制。将皮肤标本,用含有抗生素的呵逑雌し糇橹难R汉臀圩眨羧テ海%氧化碳培养箱中作用,以分离成纤维细胞,收集和洗涤所得的细胞,新分离出的成纤维细胞密度约痬尤氲胶ヌヅQG的嘌信嘌上宋赴こ擅芗ゲ愫螅赴芏仍赴谏さ细胞密度约达/时,供后续的实验使用。所有细胞都在无血清培养液继续培养缓蠼ń赴治组:第槲4萍に卮碳ぷ椋悍直向雠嘌恐屑尤氩煌ǘ鹊拇萍に。疞坏组为拮抗组:分别向雠嘌恐屑尤牒煌ǘ激卓棺椋悍直鹣个培养瓶中加入含不同浓度的雌激素萍に刂浓度分别为:~疞,艺疞,。疞含不同浓度张ǘ萳痬第槲U6哉兆椋翰蛔鋈魏胃稍さ奶外培养皮肤成纤维细胞。取每组体外培养的皮肤成纤维细胞中,采用检测大鼠成纤维细胞中蛋白,以及免疫组化法观察大鼠成纤维细胞中颗粒的多少,从而判断蛋白的表达水平。透射电镜观察不同雌硕士学位论文玬/×~疞,
结果体外培养的皮肤成纤维细胞,增殖活跃,形态表现良好,出现典型的梭形和柳叶形,用细胞计数法描绘细胞的生长曲线,结果显示:潜伏期为天,纤维细胞体积变小,细胞质减少,细胞核形态不规则,核染色质出现浓缩,出变化,胞质内可见许多髓样结构。结论激素浓度处理组对于成纤维细胞形态的影响。指数生长期为天,然后进入平台期。对成纤维细胞用雌二醇干预,免疫细胞化学的结果显示低剂量组与对照组作比较,两组的蛋白表达水平差异无统计学差异,高剂量组的雌激素与对照组相比,高剂量组的雌激素组的表达蛋白水平下降,,由于不同的切片的染色质凝集可以采取不同的形式在细胞核不同切面的位置,边界清楚,核膜间隙宽度的变化不等。成纤维细胞超微结构的主要病理显示线粒体肿胀,线粒体嵴结构损伤,显示空泡或云雾状的高浓度的雌激素可以下调成纤维细胞蛋白的表达水平,减少对胶原的降解,但是低浓度的雌激素没有此作用。关键词雌激素;骨形态发生蛋白撼上宋