文档介绍：天津医科大学
硕士学位论文
叶酸对体外缺氧新生大鼠神经干细胞保护作用的研究
姓名:刘佳杰
申请学位级别:硕士
专业:公共卫生与预防医学;营养与食品卫生学
指导教师:黄国伟
2012-05
中文摘要研究叶酸鲋衬芰Α⒌蛲雎省⒖寡趸芰拖吡L逋废喙氐鞍妆泶锏挠跋欤教叶酸对体外缺氧的保护作用及其可能机制。采用无血清体外细胞培养方法,培养新生大鼠,将分为椋①正常对照组叶酸浓度为痬虎谌毖跄P妥叶酸浓度为/;③缺氧叶酸低剂量组叶酸浓度为/;④缺氧叶酸高剂量组酸浓度为畉痬虎萑毖跻端崛狈ψḿ觳馊毖跛鹕撕笊窬上赴幕盍Γ嬷粕で撸挥肊试剂盒检测各组细胞培养液中同型半胱氨酸琀剑挥糜ü夥止夤舛燃殖期细胞,提取细胞蛋白,并采用试剂盒检测细胞内抗氧化指标:超氧化物歧化酶琒⒐入赘孰墓趸锩凋亡率和线粒体跨膜电位;采用方法检测各组细胞线粒体凋亡通路缺氧后形态学出现损伤迹象,叶酸可产生一定保护作用。峁显示,缺氧后各时间点,正常对照组细胞活力高于缺氧模型组和叶酸缺乏组,,,,蕴逋馀嘌娜毖跎窬上赴方法叶叶酸剂量为./:于增殖第将除正常对照组外的其他橄赴腥毖跖嘌S检测细胞内活性氧自由基琑剑慌嘌笫占甈和丙二醛,的水平;采用流式细胞仪检测相关蛋、、表达。结果果发现,叶酸添加组均低于正常对照组,且具有一定的剂量反应关系。与正常缴哔;,,
关键词:,缺氧模型组活性和泶量高于正常对照组和叶酸添加组,。结论本实验成功建立体外新生大鼠缺氧模型,研究结果显示叶酸可以促进缺氧损伤的增殖,减少凋亡。叶酸能降盚水平,提高抗氧化能力,减少活性氧自由基生成,提高线粒体跨膜电位水平,上调线粒体通路中的表达,下调活性、鞍椎谋泶铮蕴逋馊毖跛鹕说腘鸬揭定的保护作用。天津医科大学硕士学位论文
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缩略语/符号说明英文全称中文全称缩写,神经干细胞人重组碱性成纤维细胞人重组表皮生长因子叶酸劝滨0澹脱氧尿苷巢蛋白培养液二甲基亚砜四甲基偶氮唑蓝同型半胱氨酸谷胱甘肽过氧化物酶超氧化物歧化酶活性氧自由基流式细胞仪琋,。△生长因子丙二醛天津医科大学硕士学位论文猤/’一
研究现状、成果刖舌缺氧缺血性脑损伤.,橇俅渤<囊种疾病,如脑血栓、脑梗塞、脑血管痉挛等,其发病率、致残率和致死率均较高。尤其是发生于宫内和新生儿期的缺血缺氧性脑损伤,是造成脑瘫、癫痫及智力低下的重要原因。因此寻找有效可靠的防治措施尤为必要。缺氧缺血性脑损伤的发生机制复杂,主要有氧自由基损伤、兴奋性氨基酸毒性、炎症反应、细胞内钙超载和神经细胞凋亡等,大量研究表明,氧自由基损伤、神经细胞凋亡在缺血性脑损伤中起着关键作用【啤>攀甏岳矗商迳窬上赴琋的发现,消除了人们以往认为神经细胞不可再生的观念,同时也为缺氧缺血性脑损伤的治疗带来了新的希望。神经干细胞是指中枢神经系统芯哂凶晕腋履芰投嘀址只蹦的特殊细胞群,这些细胞在一定的条件下可以进行增殖、迁移并且分化成神经元和神经胶质细胞【俊K遣唤龃嬖谟诓溉槎锱咛サ腃中,而且也存在于成年哺乳动物凇T诓嗄允腋浇氖夜苣は虑海马是成年哺乳动物神经系统钗<械牟课弧D壳埃惺嗌窬低巢同部位的分离和培养技术的成功建立,为人们很好地研究和使用提供有力的实验手段和丰富的细胞来源。近年来,通过外源性或内源性途径的神经干细胞疗法为缺氧缺血性脑损伤的治疗提供了一种新的途径。但是治疗脑梗死等疾病时不可避免的面临缺氧等体内环境,如何针对脑缺血损伤机制筛选有效的药物,促进缺氧后的存活,抑制或减少凋亡的发生,成为治疗的研究热点。叶酸在体内经叶酸还原酶的作用,产生有生理活性的四氢叶酸,四氢叶酸在体内的主要作用为一碳单位的传递体,参与嘌呤和嘧啶的合成,并进一步合成;参与氨基酸之间的相互转化,充当一碳单位的载体。体内叶酸缺乏则一碳单位传递受阻,核酸合成及氨基酸代谢受影响,而核酸及蛋白质合成正是细胞增殖、组织生长和机体发育的物质基础,因此,叶酸对细胞分裂和组织生长具有极其重要的作用。有