文档介绍:4
色谱法
(层析法)
\实验目的
•:・1、了解色谱法分离、提纯有机化合物的基本 原理和应用O
•:・2、掌握柱层析、薄层层析的操作技术。
二、实验原理
聚色谱法(Chromatography)亦称色层法、 层析法等。
最色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重
要方法之一。
来色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某 一物质中的吸附或溶解性能(分配)的不同, 或其亲和性的差异,使混合物的溶液流经该 种物质进行反复的吸附或分配作用,从而使 蓉组分分矗。
色谱法须在两相系统间进行。一相是固定相, 需支持物,是固体或液体。另一相为流
动相, 是液体或气体。当流动相流经固定相时,被) 分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失 去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解 吸的过程。随着流动相不断向前流动,被分 离物质间出现向前移动的速率差异,由开始 的单一区带逐渐分离出许多区带,这个过程 叫展层。
分类
按层析的机理划分:
吸附层析、分配层析、离子交换层析、 凝胶过滤层析、亲和层析等。
吸附层析:利用吸附剂表面对不同组 分吸附性能的差异,达到分离鉴定的目的。
分配层析:利用不同组分在流动相和 固定相之间的分配系数不同,使之分离。
离子交换层析:利用不同组分对离子 交换剂亲和力的不同。
凝胶层析:利用某些凝胶对于不同分 子大小的组分阻滞作用的不同。
:
气相色谱(层析)、液相色谱(层析)O
这两大类层析是以流动相不同来划分 的。
如同时区分流动相和固定相,划分为:气 固层析、气液层析、液固层析和液液层析 寻O 1
•:
,使样品沿一个
柱屋析、纸层析、薄层层析、高效液相层 析等。
n
兼魏需滤寵黔蠶豁騎后
◎ 尊层析:
定。
以上划分无严格界限,有些名称相互交 叉,如亲和层析应属于一种特殊的吸附层析, 纸层析是一种分配层析,柱层析可做各种层 析。
TA1
卜吸附色谱主要是以氧化铝、硅胶等为吸附剂, 将一些物质自溶液中吸附到它的表面上,而 后用溶剂洗脱或展开,利用不同化合物受到 吸附剂的不同吸附作用,和它们在溶剂中不 同的溶解度,也就是利用不同化合物在吸附 剂上和溶液之间分布情况的不同而得到分离。 吸附色谱分离可釆用柱色谱和薄层色谱两种
方式。
H— (_)柱层析法
1 ■原理
ilA
流动相流过时各组分会以不同的速率向下移动,吸 附弱的组分以较快的速率向下移动。随着流动相 的移动,在新接触的固定相表面上又依这种吸附i -溶解过程进行新的分配,新鲜流动相流过已趋 平衡的固定相表面时也重复这一过程,结果是吸 附弱的组分随着流动相移动在前面,吸附强的组 分移动在后面,吸附特别强的组分甚至会不随流 动相移动,各种化合物在色谱柱中形成带状分布, 实现混合物的分离。