文档介绍：第三军医大学
博士学位论文
白细胞去除术对内毒素血症犬肺损伤的影响及机制研究
姓名:贺志高
申请学位级别:博士
专业:外科学(普外)
指导教师:黄显凯
201205
白细胞去除术对内毒素血症犬肺损伤的影响及机制研究摘要瀑布样炎症继发性弥漫性肺实质损伤、,尽管应用先进的重症监护及治疗,并改进了治疗发展中起到了关键的作用,中性粒细胞活化并产生的各种有害介质介导了疉时肺的炎性损害,其中,中性粒细胞弹性蛋白酶是中性粒细胞中最重要的酶类炎性介于脓毒症疉颊叩闹芊闻莨嘞匆褐性督衔此劳稣呶8摺S捎诜渭爸肺泡灌洗液中的中性粒细胞来源于循环血,我们推测,抑制或部分去除循环血中白细于临床防治脓毒症疉0紫赴コ跏且恢滞ü囟ㄗ爸迷谔寤蚶胩迦コ急性肺损伤,和急性呼吸窘迫综合征,怯啥嘀盅仔越橹始靶вο赴餐斡耄⒊始读7糯蟮策略,疉袢跃哂懈叻⒉÷始案卟∷缆省J昀矗诙嗾攵訟/的预防和治疗努力收效甚微。迄今,疉允橇俅参V夭⊙а芯康娜鹊愫湍训恪因此,对于疉駻/高风险患者迫切需要发展一种新的预防和治疗策略。目前公认,肺内中性粒细胞扣押、渗出和引起的肺炎性损害在疉姆⑸质,在疉姆⑸衅鹱钗V匾5淖饔谩Q费0紫赴乇鹗侵行粤O赴高,是各种细菌性脓毒症最重要的特征,国内外既往的研究已证实,中性粒细胞在死胞可能会成为新的疉し篮椭瘟频挠行侄巍<韧谔宓难芯恐な担ü制循环血中的中性粒细胞,可减少受试动物肺病理损伤,最近一项去除大鼠内毒素血症循环血白细胞的研究也取得了类似的结果。上述针对体内所有白细胞及中性粒细胞的技术尽管可以减轻受试动物的炎性损伤,但均来自于小的啮齿动物,同时,上述通过抗体或细胞毒性药物抑制或破坏体内白细胞,存在严重副作用及感染风险,难以用液中部分白细胞、以减少白细胞炎性损伤为目的治疗技术,在欧洲广泛用于难治性自身免疫性疾病,本研究拟通过白细胞去除术去除内毒素血症犬部分循环血氖浚鄄旒跎傺费狿对内毒素血症犬急性肺损伤的影响,从而为疉牧俅卜乐慰E碌乃悸芳胺椒ā目的观察白细胞去除对内毒素血症犬急性肺损伤预防作用及机制;探讨白细胞去除术在脓毒症患者中潜在临床应用意义。第三军医大学博士学位论文
瓵/发生率:渥⒑,椤椤榉直鹩,检验,2钜炀哂型臣蒲б庖濉离机和单核细胞程序掷胙费0紫赴菔苁远锾逯亍⑸沓ぁ⒀O赴数水平适当调整分离周期数,并据白细胞收集袋中白细胞计数监测结果评估分离效果。执行操作和程序同组,但通过将白细胞收集袋中分离物持续回输入白细胞迅速下降,小时后开始回升,约在小时后恢复至正常水平。目标白细胞刀片切取数块分别固定于ザ嗑奂兹┖.ノ於┲蟹直鹦衅胀ú±怼⒎问抵氏赴凋亡、扫描和透射电镜检查。同法另取左下肺叶数块备测肺实/干重比、⑽比グ紫胞组、白细胞去除组6锫樽怼⒓嗖狻⒒低ㄆ和血管准备完成、且血液动力学稳定后,各组动物均静脉泵入築造内毒素血症模型。组在渥⒖J己,以连续血流血细胞分积和目标白细胞水平设置参数分离周期数、血流速。分离过程中监测外周血白细胞计血进行伪白细胞去除。选择邪紫赴コ腔谠な笛橹蟹⑾郑猜鍪淙隠后,计数./确定系基于预实验中所测唤】凳苁匀的白细胞计数.../下限水平。为稳定血液动力学,适量给予输液或血管活性药物。试验时测定外周血蚉计数、血清中性粒细胞弹性蛋白酶和髓过氧化物酶幕∷健⒉⒃贚输注、∈敝馗床舛ā外周血标本收集后、转离心分钟,收集上清液立即冻存于.。覆釴及酶联免疫吸附法,。渥⒑放血处死动物,立即剖胸取右中肺叶行支气管肺泡灌洗并收集支气管肺泡灌洗液,糜诹⒓醇觳釨中蚉计数,余液分装后于.℃冻存备测。。±表示,数据采用重复测量资料方差分析或单因素方差分析,组间的两两多重比较采用ǎ患剖柿喜捎结果/、/例受试犬发生,无发生。生的时间,平均甃及对循环血白细胞及中性粒细胞计数的影响:渥⒑笱费癙计数迅速下降,,约骔恢复至基础水平,然后进一步上升,同时壤撸第三军医大学博士学位论文/;
低于皊。而隨榧浔冉衔尴灾钜煨浴束时及后组血清水平仍明显低于蚐簆.:,⑸胛捶⑸鶤动物循环血癗鄄欤悍⑸鶤受试动物循环血二者与受试犬小时之氧合指数呈负相关,,内毒素血症后达到疉锒媳曜夹枰可明显降低外周血癙计数,此趋势持续∈币陨簆.;,同时,各组动物间癙计数均值亦有显著性差异,组明显甃和对血清水平的影响:渥⒑笱G錘匠中撸部分去除循环血蚉后,血清水平绝对值并无下降,但结,比较受试动物各时间点均值,组亦低于蚐。髯榧銪鞍着ǘ取⒎