文档介绍：宁夏大学
硕士学位论文
水稻硅转运子基因的克隆与表达载体的构建
姓名:陈虞超
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:宋玉霞
20090501
摘要、厶口表达蛋向的情况,构建原核表达载体絝雙/:表达载体鏹河雙娇冢湓吮泶锝峁显て冢构建出植物水稻硅转运子、的两个基凶厶、/难芯恳丫贜又上发表。厶,细胞转运到中柱中的作用。但是国内有关水稻硅元素转运子及其基因厶“、厶口的研究还未见报凶厶、厶酃菇ㄆ浔泶镌靥澹云谕ü;蚣际跤τ玫脚┳魑镏校岣吖柙K氐淖T四芰Γ根据中、厶的序列设计两对上下游引物,通过从水稻宁粳和风水稻是一种典型的硅积累型植物,其旺盛生长和高产能力对硅的需求量很大。硅元素对提高农作物的抗逆性起着重要的作用,包括缓解真菌感染和虫害,减轻其它非生物胁迫,提高光截获能力,减小蒸腾损失。但是不同农作物的硅含量差别很大,从%到%不等:如何提高农作物对硅元素的吸收以加强其抗逆性是一个亟待解决的问题。水稻硅元素的转运子及其转运机理研究的较为清楚,水稻根部的转运子负责硅元素的转运,转运子决定水稻对硅元素转运的能力。编码全长诟刻匾毂泶铮嗦氲淖T俗覮哂薪ü柙K卮油饨缛芤鹤T说礁赴的作用;/琺ǔ彩窃诟刻匾毂泶铮嗦氲淖T俗覮哂薪ü柙K卮痈道。在前人研究的基础上,本研究以宁粳为材料,利用兀榧际蹩寺∷竟柙K刈T俗踊增加抗逆性。幼根的总欣┰鯨、/腸蛄校直鹂寺〉絧甌载体中。通过定、酶切鉴定以及测序鉴定筛选出正确的克隆定名为、。将、载体,—靥宸直鹩孟拗菩阅谇忻竢盖校缓蠼康钠畏直鹆悠鹄础Mü〉初步研究了原核表达载体原核表达融合蛋白的情况。最后采取电击转化法将载体甇、甇分别转化到农杆菌中。研究结果:寺〉玫交譒③趟瑁⒐菇ǔ隹寺≡,扩增得到的厶③炭诘腸蛄杏隢械耐葱跃%;菇ǔ鲈表达载体甇、甇,并成功将它、;农杆菌中。水稻硅允素转运子基凶厶、厶忍的克隆及表达载体的构建,为利用转基凶技术培育硅/己素转运能力较强,抗逆性较高,产量较人的农作物新品种奠定了基础。关键词:硅转运子,厶唬倘蹋泶镌靥
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缩写词腭缩写词山英文名中文名碱基对互补脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸核糖核酸信使氨苄青霉素卡那霉素庆大霉素利福平溴化乙锭乙二胺四乙酸钠盐三羟甲基氨基甲烷讳氯哚一一半乳糖苷异丙基一一沪硫代半乳糖苷十二烷基硫酸钠克毫克毫升毫摩尔秒分小时每分钟转速单位微升微克细茼培养肇美国国家信息中心阅读框聚合酶链式反应反转录聚合酶链式反应脱氧核苷姿舣重蒸馏水.····瓸猼‘
挺礞缝琵恃么毕时间:沙甓嘣驴笕独创性声明关于论文使用授权的说明泗辍卵迦酗年叨嗜本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得宁夏大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间:本人完伞了解宁夏大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论义的复印件和磁盘,允许论义被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论义。同意宁夏大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的伞部或部分内容。导师签名:
,研究者也对相关植物进行了深入的研究。水稻作为一种模式植物,且较其它禾本科作物需吸收利用更多的硅,因此对水稻硅转运机理是近年来研究的热点。等学者一直关注于水稻硅元素及其吸收转运机理的研究并取得一系列成果,对水稻硅元素的吸收、转运机理研究的较为清楚引。植物吸收矿质元素的主要部位是根毛,但等¨难芯勘砻魑展璧牟课蝗词遣喔6圆能形成根毛的突变体⒉荒苄纬刹喔耐槐涮錜、野生型水稻銎分值墓韬孔鞅冉希发现墓韬坑胍吧鸵恢拢鳵硅含量为野生型的;在距根尖端没有侧根和根毛的根尖处,、野生型间硅含量无差别:而在距根尖端的成熟区,硅含量较野生型低,鸵吧椭湮薏畋稹U庑┙峁砻鳎璧奈展讨懈ú黄鹬匾W用,起作用的足侧根、且控制侧根形成的基因为显性基因。根毛对依靠扩散作用而移动的元素吸收很重要。但对种植于水中的水稻而言,营养物质可以自由扩散到根表面,通过根毛扩大吸收衙积而进行吸收没有意义;而凡硅在土壤中以无电荷分子的形式存在,其含量较其它元素高。这可能足存溶液土壤条件下,水稻根毛对硅的吸收起作用的坂因。物种硅含量差别主要来源于根部硅吸收能力的差别,与硅吸收的同机制有关“9ス于