文档介绍：紫外可见分光光度法 (5)
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§1-1 吸光光度法基本原理
一、吸光光度法的概念
在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法。
主要有:
红外吸收光谱：分子振动光谱，1000m ,主要用于有机化合物结构鉴定。
紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。
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可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。
二、吸光光度法的特点：
（1）灵敏度高；
（2）准确度高；
（3）操作简便快速；
（4）应用广泛。
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三、光的基本性质
光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长、频率、光速c、波数（cm-1）等参数来描述：
= c ； 波数 = 1/ = /c
光是由光子流组成，光子的能量：
E = h = h c /
（Planck常数：h= × 10 -34 J × S )
光的波长越短（频率越高），其能量越大。
白光(太阳光)：由各种单色光组成的复合光
单色光：单波长的光(由具有相同能量的光子组成)
可见光区：400-750 nm
紫外光区：近紫外区200 - 400 nm
远紫外区10 - 200 nm （真空紫 外区）
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四、物质的颜色
物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收而产生的。
表1-1 物质的颜色与吸收光颜色的互补关系
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五、物质对光的选择性吸收及吸收曲线
M + h M *
M + 热
M + 荧光或磷光
基态 激发态
E1 （△E） E2
E = E2 - E1 = h
量子化 ；选择性吸收;
分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同；
用不同波长的单色光照射，测吸光度— 吸收曲线与最大吸收波长 max；
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六、光吸收曲线
用不同波长的单色光照射某一物质测定吸光度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制曲线，描述物质对不同波长光的吸收能力。
图1-1吸收曲线
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吸收曲线的讨论：
（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax
（2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。
（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。
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（4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，在λmax处吸光度A 的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。
（5）在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。
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七、光吸收的基本定律
—比耳定律
布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b
1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。A∝ c
二者的结合称为朗伯—比耳定律，其数学表达式为：